МИНЕРАЛЬНАЯ ПЛОТНОСТЬ КОСТНОЙ ТКАНИ КАК ФАКТОР

Страница создана Савва Куликов
 
ПРОДОЛЖИТЬ ЧТЕНИЕ
РАДИАЦИОННАЯ БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ, 2019, том 59, № 1, с. 103–112

                                             РАДИОЭКОЛОГИЯ
УДК 539.163:611.018.4:612.392.6:57.084

       МИНЕРАЛЬНАЯ ПЛОТНОСТЬ КОСТНОЙ ТКАНИ КАК ФАКТОР
          ДЕПОНИРОВАНИЯ 90Sr: ДАННЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТА
                                         © 2019 г. В. И. Стариченко*
                    Институт экологии растений и животных УрО РАН, Екатеринбург, Россия
                                       * E-mail: starichenko@ipae.uran.ru
                                          Поступила в редакцию 11.04.2018 г.

       Исследование кинетики остеотропных радионуклидов (в частности 90Sr) в зависимости от функци-
       онального состояния костной ткани связано с существующей угрозой радиационных инцидентов и
       все большим использованием медицинских радионуклидных препаратов для лечебных и диагно-
       стических целей. Остеотропные радионуклиды, накапливаясь в скелете и оставаясь в нем на про-
       должительный срок, являются источниками хронического внутреннего облучения. Величина их
       инкорпорации (результирующая процессов накопления и выведения) зависит от множества эндо-
       и экзогенных факторов. Важнейшим эндогенным фактором является минеральная плотность кости
       (МПК) – одна из основных ее характеристик. В данной работе изучена зависимость величины на-
       копления 90Sr от МПК после однократного введения радионуклида. Исследование проведено в ла-
       бораторном эксперименте на половозрелых разновозрастных линейных мышах CBA, развиваю-
       щихся в стандартных условиях вивария и под влиянием факторов, модифицирующих ростовые
       процессы в организме. Показана обратная корреляция (r = –0.77, p < 0.0001) между накоплением
       90Sr и степенью минерализации скелета. Проведено сравнение с данными, ранее полученными на-
       ми в природной среде на двух видах мышевидных грызунов, обитающих в зоне Восточно-Уральско-
       го радиоактивного следа в условиях хронического поступления 90Sr.

       Ключевые слова: 90Sr, скелет, модифицирующие факторы развития, мыши СВА, минеральная плот-
       ность кости (МПК)
       DOI: 10.1134/S0869803119010107

   Актуальность проблемы исследования меха-                 метаболическим характеристикам [7, 8]. Исполь-
низмов кинетики остеотропных радионуклидов                  зование же средних величин для отдельного ин-
(90Sr, 224,226,228Ra, 238,239Pu, 241Am и других) и выяв-    дивида может привести к существенной ошибке в
ление факторов, от которых зависят особенности              оценке кинетики радионуклида [3, 9, 10] и соот-
их метаболизма, связаны с неснижающейся угро-               ветственно дозы внутреннего облучения. Напри-
зой радиационных инцидентов и аварий, при ко-               мер, индивидуальная изменчивость депонирова-
торых радионуклиды поступают в организм боль-               ния в ряде случаев приводит к различиям в эф-
ших групп населения и сельскохозяйственных                  фекте внутреннего облучения более чем на
животных [1–3], а также с широким применени-                порядок величин [11].
ем радиофармпрепаратов для целей диагностики
и лечения. Накапливаясь в скелете под слоями                   Изучение в лабораторных экспериментах по-
вновь образующейся кости, остеотропные радио-               казало, что кинетика остеотропных веществ в ор-
нуклиды задерживаются в нем на длительный                   ганизме позвоночных зависит от морфофизиоло-
срок и становятся источником хронического об-               гических факторов (МФФ) самого организма
лучения близлежащих тканей и всего организма,               [12–14]. МФФ представляют собой функцио-
которое может вызвать хроническую лучевую бо-               нальную систему, состоящую из морфологиче-
лезнь, канцерогенез и уменьшение продолжи-                  ских структур, физиологических процессов, фи-
тельности жизни [3–6].                                      зико-химических и биохимических реакций, ко-
   Существование значительных индивидуаль-                  торые определяют накопление в костной ткани и
ных различий кинетики остеотропных радионук-                выведение из нее остеотропных веществ. Пара-
лидов характерно даже для однородных по полу и              метры МФФ закономерно изменяются в процес-
возрасту выборок. В частности, в лабораторном               се роста и развития организма. Как эндогенные,
эксперименте среди интактных животных встре-                так и экзогенные влияния на обмен веществ в
чаются особи, существенно различающиеся по                  скелете опосредуются через систему МФФ.

                                                         103
104                                       СТАРИЧЕНКО

   Минеральная насыщенность (плотность) ко-        тием организма, в конкретные задачи исследова-
сти (МПК) является одним из МФФ. Молодая           ния входила оценка взаимосвязи накопления 90Sr
недообызвествленная кость более проницаема         и МПК у лабораторных инбредных мышей раз-
для радионуклидов, которые затем фиксируются       ных возрастов, развитие скелета которых прохо-
в минеральной фракции. Влияние минеральной         дило на фоне модифицирующих факторов.
насыщенности кости на депонирование остео-
тропных веществ известно давно [15–18]. Есть
указания на пониженную аккумуляцию 90Sr при                МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА
увеличении степени минерализации скелета жи-           Исследование проведено на инбредных мы-
вотных из зон, загрязненных радионуклидами         шах линии CBA (n = 444), разведенных в виварии
[19]. Нами также показана отрицательная корре-     ИЭРиЖ УрО РАН. С целью модификации про-
ляция этих характеристик у животных, обитаю-       цессов роста для некоторых групп использована
щих на территории Восточно-Уральского радио-       несбалансированная диета (овсяная монодиета)
активного следа (ВУРСа), образовавшегося в ре-     самок с момента рождения у них потомства. Нами
зультате аварии на химкомбинате “Маяк” в           ранее показано [14], что овсяная монодиета у ли-
1957 г. [7]. Однако для понимания особенностей     нейных мышей, начатая с момента рождения
формирования дозовых нагрузок на скелет и це-      (вначале – опосредованно – через молоко мате-
лостный организм в условиях хронического по-       ри), приводит к замедлению ростовых процессов
ступления 90Sr требуется более детальное изуче-    (в том числе, скелета). Это связано с недостатком
ние обнаруженной взаимосвязи. Это связано с        пластических веществ, необходимых для есте-
тем, что изменение МПК, трансформируя за-          ственного развития детенышей. Белки овса дефи-
держку 90Sr, оказывает влияние на поглощенную      цитны по многим аминокислотам (метионин, ги-
тканевую дозу. Такое исследование возможно         стидин, триптофан и лизин) [38]. Кроме того, ов-
провести в строго контролируемых условиях ла-      сяная монодиета снижает всасывание кальция в
бораторного эксперимента.                          кишечнике и увеличивает выведение кальция из
   Одним из наиболее важных физиологических        скелета. Эти недостатки практически полностью
факторов, модифицирующих кинетику обмена           компенсируются материнским организмом во
радионуклидов и биологические эффекты, вы-         время беременности, и, в значительно меньшей
званные инкорпорированными радионуклидами,         степени, во время лактации. Однако при последу-
является возраст [4, 12, 20–27 и др.], с которым   ющем развитии происходит замедление роста и
связано изменение гормонального фона, регули-      минерализации скелета детенышей.
рующего скорость накопления и выведения кост-          Во избежание несовместимого с жизнью и здо-
ных минералов. Кроме того, процессы роста ске-     ровьем дефицита кальция и витаминов в рацион
лета с рождения до взрослого состояния сопро-      всех экспериментальных животных включали
вождаются повышением уровня минерализации          минеральную подкормку кусковым мелом (ad li-
скелета (у человека с определенного возраста на-   bitum) и свежую зелень (в том числе при содержа-
чинается уменьшение), определяющего проч-          нии животных на измененной диете). Эти добав-
ность костей [17, 18, 28–32], однако необходимо    ки, однако, не компенсировали полностью дефи-
исследование, позволяющее оценить количе-          цит белка и минералов в рационе.
ственную связь метаболических и морфофизио-            Самки и их потомство сразу после родов были
логических параметров скелета индивидов раз-       разделены на две группы – “контроль” и “моно-
ных возрастов. В литературе исследование дина-     диета”. Контрольных (интактных) животных со-
мики минеральной плотности костной ткани           держали на стандартном рационе вивария, жи-
мышевидных грызунов под влиянием возраста          вотных группы “монодиета” – на овсяной моно-
или экзогенных воздействий представлено недо-      диете (в течение всего периода молочного
статочно полно [33–37].                            вскармливания и до конца эксперимента). В ме-
   Поскольку кинетика остеотропных радионук-       сячном возрасте самки были отсажены от детены-
лидов в значительной степени определяется ки-      шей.
нетикой естественных костных минералов (каль-          В возрасте 8 нед части потомства из групп “мо-
ций, фосфор), то все факторы, влияющие на ми-      нодиета” и “контроль” однократно внутрибрю-
неральный обмен млекопитающих (количество          шинно был введен 90Sr (3.2 кБк на животное),
минералов и белков в диете, изменение гормо-       остальным – в 12 нед (животные 1-го и 2-го воз-
нального фона и т.п.), будут влиять на кинетику    раста соответственно). Использовано индикатор-
остеотропных радионуклидов.                        ное количество радионуклида, которое в 200–
   Цель работы – изучить влияние эндо- и экзо-     300 раз меньше количества, вызывающего острые
генных факторов на индивидуальное накопление       токсические эффекты, а дозы облучения, созда-
остеотропного 90Sr, связанное с МПК. Поскольку     ваемые им, не приводят к нарушению процессов
МПК закономерно определяется ростом и разви-       жизнедеятельности организма [23, 39, 40]. Через

                              РАДИАЦИОННАЯ БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ             том 59   №1    2019
МИНЕРАЛЬНАЯ ПЛОТНОСТЬ КОСТНОЙ ТКАНИ                                                 105

Таблица 1. Удельная активность 90Sr в костной ткани, массовые показатели животных и коэффициент озоления
костей через 3 нед после введения радионуклида (M ± m)
                                                                        Масса                             90
Возраст,                                                                               Коэффициент         Sr,
                Группа      Пол             n        Масса тела, г    бедренных
  нед                                                                                    озоления      % от исх/г
                                                                      костей1), г
    11     Контроль-1  Самцы                94        18.8 ± 0.1*    0.1031 ± 0.001*   0.29 ± 0.002    27.9 ± 0.7*
                       Самки                72        16.0 ± 0.1     0.0969 ± 0.001    0.30 ± 0.002    31.0 ± 0.8
                       Среднее             166        17.6 ± 0.2     0.1004 ± 0.001    0.30 ± 0.001    29.2 ± 0.5
                       по группе
           Монодиета-1 Самцы                62        11.8 ± 0.3     0.0733 ± 0.001   0.22 ± 0.003     51.2 ± 1.1
                       Самки                71        11.6 ± 0.2     0.0722 ± 0.001   0.23 ± 0.003     49.3 ± 1.0
                       Среднее             133        11.7 ± 0.2**   0.0727 ± 0.001** 0.23 ± 0.002**   50.2 ± 0.7**
                       по группе
    15     Контроль-2 Самцы                 51        22.8 ± 0.3*    0.1206 ± 0.001    0.33 ± 0.002    18.9 ± 0.3*
                       Самки                31        19.8 ± 0.2     0.1178 ± 0.001    0.34 ± 0.003    22.0 ± 0.5
                       Среднее              82        21.7 ± 0.3     0.1196 ± 0.001    0.33 ± 0.002    20.1 ± 0.3
                       по группе
           Монодиета-2 Самцы                19        15.0 ± 0.4*    0.0894 ± 0.002   0.24 ± 0.004     36.5 ± 2.2
                       Самки                34        13.0 ± 0.4     0.0837 ± 0.002   0.25 ± 0.006     41.3 ± 1.8
                       Среднее              53        13.7 ± 0.3**   0.0858 ± 0.002** 0.25 ± 0.004**   39.2 ± 1.4**
                       по группе
1) Обе кости.
* Различия между самцами и самками значимы на уровне p < 0.05 (по t-критерию Стьюдента).
** Различия между опытной и соответствующей контрольной группой значимы на уровне p < 0.01 (по t-критерию Стьюдента).

3 нед (в возрасте 11 и 15 нед соответственно) жи-           эталонов [44]. Для простоты изложения под ак-
вотные были подвергнуты эфирной эвтаназии.                  тивностью 90Sr подразумевали активность, обуслов-
Инъекцию 90Sr и эвтаназию животных осуществ-                ленную 90Sr + 90Y.
ляли под эфирным наркозом [41, 42]. Таким обра-                Минеральная плотность костной ткани – это
зом, всего было сформировано четыре экспери-                количество минералов в расчете на единицу объ-
ментальные группы: “контроль”–1 и –2, “моно-                ема или площади кости. В наших исследованиях
диета”–1 и –2; индексы 1 или 2 указывают на                 показателем МПК считали коэффициент озоле-
возраст животных.                                           ния, т.е. количество минералов (золы) в расчете
   С целью выявления начального срока форми-                на единицу массы сырой кости.
рования различий (между контролем и опытом) в                  Статистическая обработка данных выполнена
накоплении 90Sr были сформированы подгруппы,                с помощью пакета программ Microsoft Excel 2002
включающие по пять животных из каждой груп-                 и Statistica 6.0 (StatSoft Inc.). Для описания дан-
пы 1-го возраста (“контроль”–1.1 и “монодие-                ных использовали среднее значение и стандарт-
та”–1.1). Эти животные были подвергнуты эвта-               ную ошибку среднего. Значимость различий меж-
назии через 1 сут после введения радионуклида.              ду выборками оценивали с помощью t-критерия
   Исследовали накопление 90Sr в бедренной ко-              Стьюдента и U-теста Манна–Уитни. Для анализа
сти, так как принято считать, что у лабораторных            связи между удельной активностью 90Sr и МПК
грызунов она репререзентативно отражает про-                использовали линейный коэффициент корреля-
цессы, протекающие в целостном скелете [12, 43].            ции Пирсона. Статистический вывод осуществ-
Костную ткань (в анализ брали обе кости) озоля-             ляли на 5% уровне значимости (p < 0.05).
ли до постоянной массы при температуре 600 °С в
течение 5 ч, затем с помощью мокрого озоления
готовили пробы для радиометрии [44].                                            РЕЗУЛЬТАТЫ
   Радиометрию проб осуществляли на приборе                    Массовые характеристики, величина коэффи-
бета-счета VAG–120 (VEB RFT Messelektronik,                 циента озоления и результаты радиометрическо-
Германия). Для расчета удельной активности об-              го анализа костной ткани экспериментальных
разцов (% от введенного на г сырой кости) граду-            животных, подвергнутых эвтаназии через 3 нед
ировку прибора производили по серии калийных                после введения 90Sr, представлены в табл. 1.

   РАДИАЦИОННАЯ БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ                    том 59    №1     2019
106                                             СТАРИЧЕНКО

Коэффициент озоления                                       90Sr, % от исх/г      Коэффициент озоления (k)
0.40                                                       55                                       0.34
                                 r = 0.8; p < 0.0001
0.36                                                       50                                             0.32
                                                           45
0.32                                                                                                      0.30
                                                           40
                                                                                                          0.28
0.28
                                                           35
                                                                                                          0.26
0.24                                                       30
                                                                                                          0.24
                                                           25
0.20                                                                                              90Sr
                                                           20                                             0.22
                                                                                                  k
0.16
                                                           15                                             0.20
       0.04    0.06     0.08    0.10     0.12     0.14                  1      2    3         4
                                                                               Группа
                                       Масса костей, г

                                                           Рис. 2. Сравнительное изменение удельной активно-
   Рис. 1. Величина коэффициента озоления в зависи-        сти 90Sr и коэффициента озоления костной ткани у
   мости от массы костей. Пунктиром обозначены гра-        мышей экспериментальных групп: 1, 3 – контроль; 2,
   ницы 95%-ного доверительного интервала для линии        4 – монодиета (возраст 11 и 15 нед соответственно).
   регрессии.                                              Показан средний ±95%-ный доверительный интер-
                                                           вал.

   Для массовых характеристик и коэффициента
озоления четко прослеживается возрастная тен-            но и о задержке развития и гормональных сдвигах
денция их увеличения: у животных в возрасте              в организме опытных животных.
11 нед все они значимо (p < 0.01) меньше тех же
показателей 15-недельных животных. Это свиде-               Как в контроле, так и в опыте наблюдается
тельствует о продолжающемся росте эксперимен-            значимое снижение уровня депонирования 90Sr с
тальных животных и о повышении минеральной               возрастом. При этом аккумуляция 90Sr у живот-
плотности их костей.                                     ных опытных групп значимо (p < 0.01) выше.
   На протяжении всего эксперимента живот-                  Влияние пола животных на массовые показа-
ные, содержавшиеся на овсяной диете, были го-
раздо мельче контрольных (без выраженных дис-            тели и аккумуляцию 90Sr выявлено не во всех экс-
пропорций в размерах тела). Их характеристики            периментальных группах. Половой диморфизм
значимо ниже соответствующих контрольных.                характеристик массы у большинства видов позво-
Причем изменения массы тела и бедренных ко-              ночных хорошо известен. На метаболические по-
стей пропорциональны друг другу, а увеличение            казатели половая принадлежность животных
зольности костей пропорционально изменению               влияет в меньшей степени. Например, для 90Sr
их массы (рис. 1).                                       половые различия значимы в обеих контрольных,
                                                         но отсутствуют в опытных группах. Половые раз-
   Отметим также различие поведенческих и фи-            личия для коэффициента озоления не обнаружены.
зиологических реакций животных групп “моно-
диета” и “контроль”. Например, у контрольных                Сравнение уровня аккумуляции 90Sr и величи-
животных уже в возрасте 11 нед наблюдали случаи          ны коэффициента озоления, который является
спаривания и последующей беременности самок              индикатором МПК, представлено на рис. 2. Вид-
(родивших и беременных самок выбраковывали               но, что величина накопления 90Sr и коэффициент
из эксперимента, их число было около 5%) и от-           озоления зеркально соотносятся друг с другом.
сутствие такового у животных, содержавшихся на           Бόльшей величине депонирования 90Sr соответ-
овсяной монодиете, как первой, так и второй воз-         ствует меньшая степень минеральной насыщен-
растной групп. Кроме того, при неполноценном             ности кости.
рационе питания отсадка самок в месячном воз-
расте потомства приводила к гибели части дете-              Зависимость депонирования 90Sr от зольности
нышей от истощения (около 3–4%), так как они             костей представлена на рис. 3. Выявлена отрица-
оказались не готовы к переходу на самостоятель-          тельная корреляция (r = –0.77, p < 0.0001) между
ное питание. Приведенные факты свидетельству-            величиной накопления 90Sr и коэффициентом
ют не только о нарушении ростовых процессов,             озоления.

                                  РАДИАЦИОННАЯ БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ                  том 59    №1     2019
МИНЕРАЛЬНАЯ ПЛОТНОСТЬ КОСТНОЙ ТКАНИ                                                            107

   В табл. 2 представлены исследуемые показате-                90Sr, % от исх/г
ли 8-недельных экспериментальных животных                      80
через 1 сут после введения 90Sr. Различия между                                                       r = –0.77; p < 0.0001
опытной и контрольной группой для всех показа-                 70
телей значимы на уровне p < 0.01 (по U-тесту
Манна–Уитни).                                                  60
                                                               50
                  ОБСУЖДЕНИЕ
                                                               40
   Массовые характеристики. Изменение массо-
вых показателей в экспериментальных группах                    30
совпадает с полученными нами ранее данными:
животные, длительное время содержавшиеся на                    20
овсяной монодиете, резко отстают от сверстни-
ков, развивающихся на фоне стандартной диеты                       10
или монодиеты, имевшей место в другие периоды
пре- и постнатального развития [14]. Влияние                       0
                                                                   0.16       0.20     0.24      0.28   0.32  0.36    0.40
возраста выражается в росте животных и увеличе-                                                      Коэффициент озоления
нии массы тела и скелета. Эффект фактора “пол”
проявляется в распространенном в природе явле-
нии полового диморфизма массовых характери-
стик (в частности, массы тела).                                         Рис. 3. Удельная активность 90Sr в зависимости от ко-
                                                                        эффициента озоления кости. Пунктиром обозначены
   МПК. Увеличение зольности костей животных                            границы 95%-ного доверительного интервала для ли-
всех экспериментальных групп отражает возраст-                          нии регрессии.
ную закономерность. Различия между одновоз-
растными группами связаны с использованной
диетой.                                                        тельное содержание животных на измененных
   Интерес представляет сравнение 2-й опытной                  диетах, при которых наблюдается недостаточное
группы с 1-м контролем: опытные животные в                     поступление в организм веществ, необходимых
возрасте 15 нед по всем изученным показателям                  для нормального образования костной ткани,
еще не достигли уровня 11 нед контрольных жи-                  прежде всего кальция, витаминов и белков, что
вотных. Например, масса тела – 13.7 ± 0.3 и 17.6 ±             тормозит ростовые процессы и изменяет химиче-
± 0.2 г; масса бедренных костей – 0.0858 ± 0.002 и             ский состав костей [45–47].
0.1004 ± 0.001 г; коэффициент озоления – 0.25 ±                   Накопление 90Sr. Межгрупповые различия в на-
0.004 и 0.30 ± 0.001 соответственно. Эти данные                коплении 90Sr связаны с различием возрастов на
были расценены нами как несоответствие физио-                  момент инъекции и воздействием на протяжении
логического и хронологического возрастов кост-                 длительного времени экзогенного фактора – ов-
ной ткани животных опытных групп. Т.е. диета,                  сяной монодиеты. Аккумуляция 90Sr значимо вы-
состоящая в течение длительного времени из ов-                 ше у животных опытных групп, что соответствует
са, замедляет не только темп роста тела, но и диф-             данным других авторов об изменении поведения
ференциацию морфологических структур скелета                   остеотропных радионуклидов под влиянием эн-
и свидетельствует о необходимости учета в фи-                  до- и экзогенных факторов, например, при изме-
зиологических исследованиях всех экзогенных                    нении диеты и гормонального статуса организма
факторов. В литературе имеются указания на                     (см. обзор [14]).
снижение темпов созревания скелета как на не-
специфическую реакцию костной системы на                                Отсутствие половых различий в накоплении
                                                               90Sr соответствует давно утвердившемуся в радио-
различные патологические состояния или дли-

Таблица 2. Удельная активность 90Sr в костной ткани, массовые показатели животных и коэффициент озоления
костей через 1 сут после введения радионуклида (M ± m)1
                                                              Масса бедренных            Коэффициент         90Sr,
      Группа                  n             Масса тела, г                                                            % от исх/г
                                                                 костей, г                 озоления

Контроль-1.1                  5               16.2 ± 1.0           0.0852 ± 0.004           0.30 ± 0.007         54.7 ± 3.6

Монодиета-1.1                 5               10.7 ± 0.8           0.0586 ± 0.003           0.23 ± 0.003         93.7 ± 7.8
1 Данные через 3 нед после введения 90Sr представлены в табл. 1.

   РАДИАЦИОННАЯ БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ                       том 59         №1      2019
108                                         СТАРИЧЕНКО

биологии мнению об относительно небольшом            кости. При этом отношение уровня аккумуляции
вкладе половых особенностей в накопление боль-       остеотропных радионуклидов, накапливающихся
шинства остеотропных радионуклидов [14, 24,          в этих структурах, может составлять 1 : 10 или да-
48–50]. Исключение составляют период беремен-        же 1 : 20 [16]. С возрастом замедляются рост кости
ности и лактации, когда в организме самок про-       и связанная с ним перестройка, что приводит к
исходят изменения в минеральном обмене [19, 23,      увеличению доли старой, полностью минерали-
27, 51, 52], а также период быстрого роста, когда    зованной и неактивной костной ткани. Суще-
формируется масса скелета. Темп накопления ве-       ственное различие в депонировании радионукли-
щества и его количество в это время различаются      дов в зрелой (старой) и молодой (вновь образую-
у самцов и самок за счет полового диморфизма в       щейся) костной ткани и ее обусловленность
размерах скелета (тела) [27, 52].                    степенью минерализиции обсуждаются еще с
   Связь МПК и накопления 90Sr. За 1 мес. (времен-   60-х годов прошлого века [15–18]. Роль МПК на-
ной разрыв между 1-м и 2-м возрастом) коэффи-        глядно демонстрирует диффузное отложение
циент озоления у всех животных увеличился на         остеотропных радионуклидов, в частности 90Sr, в
8–10% (что указывает на соответствующее увели-       эмбриональной слабо минерализованной, благо-
чение минерализации кости), уровень накопле-         приятной для диффузии кости, в то время как в
ния 90Sr за этот срок снизился на 20–30%. Разли-     зрелой кости с высокой минеральной плотностью
чия между одновозрастными контрольными и             радионуклид откладывается преимущественно на
опытными, находившимися на овсяной моноди-           костных поверхностях [12]. Доля радионуклида
ете животными, по этим показателям еще боль-         на поверхностях кости, из которых происходит
ше: по коэффициенту озоления различия соста-         его выведение, у зрелых животных значительно
вили 20–25%, по регистрируемой удельной ак-          выше, чем у молодых особей с более диффузным
тивности – 70–95%.                                   характером отложения. Поэтому даже при равной
                                                     доле элиминации костного вещества поверхно-
   У животных 1-го возраста через 1 сут после        стей у молодых животных скелетное удержание
введения 90Sr (табл. 2) процент удержанного 90Sr     выше [12, 15, 16, 54–56]. Радиометрические дан-
почти в 2 раза больше, чем у животных этой же        ные подтверждают это положение: у опытных жи-
группы через 3 нед. (табл. 1): в контрольной груп-   вотных с меньшей зольностью костей удельная
пе – 54.7 ± 3.6 и 29.2 ± 0.5%, в группе “монодие-    активность 90Sr больше, чем у контрольных.
та” – 93.7 ± 7.8 и 50.2 ± 0.7% соответственно. Это
связано со значительным биологическим выведе-           Даже в наблюдениях [30], где у взрослых людей
нием радионуклида в начальные сроки после вве-       с полностью минерализованной костной тканью,
дения. Значительную величину разброса данных         проживающих в радиоактивной среде, не обнару-
радиометрии через 1 сут после введения можно         жена связь между МПК и активностью 90Sr в ко-
объяснить небольшим количеством животных в           сти, указывается на возрастно-зависимое увели-
группах. Однако различия по всем параметрам          чение МПК и уровней накопления 90Sr в период
между животными групп “контроль”–1.1 и “мо-          роста организма, что согласуется с приведенны-
нодиета”–1.1 значимы (p < 0.01).                     ми данными.
   Соотношение уровня накопления 90Sr у жи-             Ранее на крысах линии Вистар нами было вы-
вотных групп “контроль”–1 и “монодиета”–1            явлено снижение скорости периостального ко-
равно 1.7 как через 1 сут, так и через 3 нед, про-   стеобразования на уровне середины диафиза бед-
шедшие после введения радионуклида (93.7/54.7 =      ренной кости с 8.5 ± 0.5 до 2.3 ± 0.3 мкм/сут в те-
= 1.7 и 50.2/29.2 = 1.7 соответственно). У живот-    чение первых 4 мес жизни [14]. В связи с этим
ных 2-го возраста это соотношение равно = 1.9        представляет интерес изучение обусловленности
(39.2/20.1), однако различия с 1-м возрастом не-     костного метаболизма интенсивностью аппози-
достоверны. Это означает, что различия в депо-       ционного роста и костной перестройки в нор-
нировании 90Sr между контрольными и опытны-          мальных и модифицированных условиях разви-
ми животными формируются в 1-е сутки после           тия скелета, в том числе после отмены модифи-
введения радионуклида, и коэффициент озоле-          цирующего воздействия.
ния (величину МПК) можно считать фактором               Закономерности, выявленные нами в данном
депонирования 90Sr.                                  лабораторном эксперименте, нашли свое под-
   Полученные данные находятся в хорошем со-         тверждение при исследовании природных есте-
ответствии с физиологией костной ткани. Моло-        ственных популяций грызунов [57]. При исследо-
дая кость пронизана густой сетью кровеносных         вании аккумуляции 90Sr в костной ткани двух
сосудов, она содержит больше воды и органиче-        видов мышевидных грызунов: мышь полевая
ских веществ, чем старая. В то же время отноше-      (Apodemus agrarius Pall., 1771) и малая лесная
ние количества минералов в старой и вновь обра-      мышь (Sylvaemus uralensis Pall., 1811), обитающих в
зующейся кости редко превышает 1.5 : 1, что спо-     зоне ВУРСа с плотностью загрязнения 90Sr 0.074–
собствует повышенной диффузии в молодой              3.7 и 3.7–18.5 МБк/м2 (2–100 и 100–500 Ки/км2 –

                                РАДИАЦИОННАЯ БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ             том 59   №1     2019
МИНЕРАЛЬНАЯ ПЛОТНОСТЬ КОСТНОЙ ТКАНИ                                                 109

периферия и эпицентр соответственно) выявлена         активного загрязнения животных, недоступных
обратная зависимость удельной активности 90Sr и       для непосредственного наблюдения в природной
МПК. Корреляционная связь удельной активности         среде.
90
  Sr и МПК составляет в эпицентре –0.42–(–0.44)          4. Отмечено, что влияние функционального
(p ≤ 0.0001); на периферии – –0.21 (p = 0.0024).      состояния костной ткани, в частности МПК, на
Более низкая обусловленность аккумуляции 90Sr         кинетику остеотропных радионуклидов может
МПК на периферии ВУРСа связана с тем, что             иметь прикладное значение и быть использовано
здесь идет более интенсивное, чем по оси следа,       в случаях сомнительного диагноза при радиодиа-
перемешивание животных с мигрантами из со-            гностике патологий скелета и для расчета погло-
предельной контрольной зоны [58]. То есть эф-         щенной тканевой дозы от радиофармпрепаратов,
фект эндогенного фактора – МПК – статистиче-          используемых для терапии костных раков и дру-
ски значим на фоне существенных флюктуаций            гих целей.
90
   Sr в среде (мозаичности загрязнения территории).
    Следует отметить, что слабоминерализован-                      БЛАГОДАРНОСТИ
ная кость присуща ряду системных заболеваний
скелета, которые характеризуются уменьшением             Работа выполнена в рамках государственного
доли костной ткани в объеме костных органов,          задания Института экологии растений и жи-
накоплением в костях неминерализованного или          вотных УрО РАН, а также частично поддержана
слабо минерализованного остеоида, усиленной           Комплексной программой УрО РАН (проект
васкуляризацией пораженных участков, сниже-           № 18-4-4-9).
нием прочности костей и возрастанием риска их            Автор выражает благодарность Н.М. Люба-
переломов от минимальной травмы или без тако-         шевскому и Е.И. Толстых за обсуждение полу-
вой [59, 60]. При этом меняются площадь костных       ченных результатов.
поверхностей и их “качество” (степень минера-
лизации), чем в значительной степени объясня-
ется повышенное накопление диагностических                          СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
радиофармацевтических препаратов [61, 62]. На-         1. Последствия техногенного радиационного воздей-
пример, у больных остеомиелитом в острой ста-             ствия и проблемы реабилитации Уральского реги-
дии их накопление в очаге поражения в 6–10 раз            она / Под общ. ред. С.К. Шойгу. М.: Комтехпринт,
больше, чем в неповрежденном участке симмет-              2002. 287 с.
ричной кости [63], аккумуляция 85Sr в костной          2. Alexakhin R.M., Buldakov L.A., Gubanov V.A. et al. Large
ткани у лиц с несовершенным остеогенезом более            radiation accidents: Consequences and protective
чем в 3 раза выше, чем в норме [64]. Следует отме-        countermeasures. M.: IzdAT Publisher, 2004. 556 p.
тить, что современные методы денситометрии             3. ICRP. Publication 103. 2007. Recommendations of the
для человека позволяют учитывать фактор мине-             International Commission on Radiological Protection //
ральной плотности в задержке остеотропных ра-             ICRP Ann. 2007. V. 37 (2–4).
диофармпрепаратов.
                                                       4. ICRP. Publication 67. Age-dependent dose to mem-
                                                          bers of the public from intake of radionuclides. Pt. 2:
                    ВЫВОДЫ                                Ingestion dose coefficients. Oxford: Pergamon Press,
                                                          1993. 167 p.
   1. Показано, что длительная несбалансирован-
ная диета (овсяная монодиета) способствует бо-         5. Аклеев А.В. Хронический лучевой синдром у жите-
лее интенсивному накоплению 90Sr за счет замед-           лей прибрежных сел реки Теча. Челябинск: Книга,
                                                          2012. 464 с.
ления темпа роста тела (скелета) и запаздыванию
дифференциации морфологических структур                6. Калистратова В.С., Беляев И.К., Жорова Е.С. и др.
скелета.                                                  Радиобиология инкорпорированных радионукли-
                                                          дов / Под ред. В.С. Калистратовой. Изд. 2-е, пере-
   2. Выявлена отрицательная корреляция (r =              раб. М: ФГБУ ГНЦ ФМБЦ им. А.И. Бурназяна
= –0.77, p < 0.0001) между накоплением в кости            ФМБА России, 2016. 556 с.
90Sr и МПК.
                                                       7. Стариченко В.И. Роль морфофизиологических ха-
   3. Установлено, что явление аккумуляции 90Sr           рактеристик скелета в депонировании 90Sr: срав-
в зависимости от МПК, показанное в данной ра-             нительное изучение / Актуальные проблемы эко-
боте в лабораторных экспериментах, обнаружено             логической физиологии, биохимии и генетики
у двух видов мышевидных грызунов на террито-              животных: Мат. II Междунар. науч. конф. / Мор-
рии ВУРСа в условиях хронического поступле-               дов. гос. ун-т им. Н.П. Огарева. Саранск: Мордо-
ния 90Sr. То есть выявленная закономерность ха-           вия–ЭКСПО, 2009. С. 136–138.
рактерна и для млекопитающих из радиоактив-            8. Стариченко В.И. Метаболизм остеотропных токси-
ной среды. Это подтверждает достоверность                 ческих веществ: наследственная детерминация //
экспериментально изученных механизмов радио-              Экол. генетика. 2010. Т. VIII. № 3. С. 27–37.

  РАДИАЦИОННАЯ БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ                том 59   №1      2019
110                                                  СТАРИЧЕНКО

 9. Likhtarev I.A., Dobroskok I.A., Ilyin L.A. et al. A study   25. Калистратова В.С., Заликин Г.А., Нисимов П.Г. и др.
    of certain characteristics of strontium metabolism in a         Биокинетика радионуклидов как функция возрас-
    homogeneous group of human subjects // Health Phys.             та экспериментальных животных // Радиац. био-
    1975. V. 28. № 1. P. 49–60.                                     логия. Радиоэкология. 1996. Т. 36. Вып. 3. С. 421–
10. Thomas R.G., Healy J.W., McInroy J.F. Plutonium par-            426.
    titioning among internal organs // Health Phys. 1984.       26. Vakili A., Jalilian A.R., Moghadam A.K. et al. Evalua-
    V. 46. № 4. P. 839–844.                                         tion and comparison of human absorbed dose of (90)
11. Любашевский Н.М., Стариченко В.И., Григоркина Е.Б.              Y-DOTA-Cetuximab in various age groups based on
    Материалы к прогнозированию индивидуальной                      distribution data in rats // J. Med. Phys. 2012. V. 37.
    дозовой нагрузки при хроническом облучении                      № 4. P. 226–234.
    остеотропными радионуклидами // I Всесоюз. ра-              27. Shagina N.B., Tolstykh E.I., Degteva M.O. et al. Age and
    диобиол. съезд, Москва, 21–27 авг. 1989 г.: Тез.                gender specific biokinetic model for strontium in hu-
    докл. Т. IV. Пущино, 1989. С. 965–967.                          mans // J. Radiol. Prot. 2015. V. 35. № 1. P. 87–127.
12. Любашевский Н.М. Метаболизм радиоизотопов в                 28. Беневоленская Л.И., Насонов Е.Л. Патогенез остео-
    скелете позвоночных. М.: Наука, 1980. 255 с.                    пороза: Руководство по остеопорозу / Под ред.
                                                                    Л.И. Беневоленской. М.: БИНОМ. Лаборатория
13. Любашевский Н.М., Попов Б.В., Мокроносов А.А. и др.             знаний, 2003. С. 77–104.
    Биологические основы межвидовых экстраполя-
    ций параметров скелетного метаболизма / Погра-              29. Оганов В.С. Костная система, невесомость и остео-
    ничные проблемы экологии: Сб. науч. тр. Сверд-                  пороз. М.: Слово, 2003. 260 с.
    ловск: УНЦ АН СССР, 1986. С. 84–102.                        30. Толстых Е.И. Половозрастные особенности мине-
14. Стариченко В.И., Любашевский Н.М., Попов Б.В.                   рализации скелета у жителей радиоактивно загряз-
    Индивидуальная         изменчивость       метаболизма           ненных территорий Уральского региона: Автореф.
    остеотропных токсических веществ. Екатерин-                     дис. … д-ра биол. наук. Челябинск: Челяб. госуд.
    бург: Наука, 1993. 168 с.                                       пед. ун-т, 2006.
15. Ньюман У., Ньюман М. Минеральный обмен кости.               31. ICRP. Publication 70. Basic anatomical and physiolo-
    М.: Иностр. лит-ра, 1961. 270 с.                                gical data for use in radiological protection: the skele-
                                                                    ton. Oxford: Pergamon Press, 1995. 81 p.
16. Энгстрем Э., Бьёрнерстед П., Клемендсон К., Нель-
    сон Э. Кость и радиоактивный стронций: Пер. с ан-           32. Osteogenesis Imperfecta: A Translational Approach to
    гл. М.: Медгиз, 1962. 128 с.                                    Brittle Bone Disease / Eds J.R. Shapiro, J. Kassim,
                                                                    P. Sponseller. Academic Press, 2013. 578 p.
17. Публикация МКРЗ 23. Человек: Медико-биологи-                33. Jee W.S.S., Yao W. Overview: animal models of osteo-
    ческие данные: Докл. рабочей группы Комитета II                 penia and osteoporosis // J. Musculoskel. Neuron In-
    МКРЗ по условному человеку. М.: Медицина,                       teract. 2001. V. 1. № 3. P. 193–207.
    1977. 496 с.
                                                                34. Sims N.A., Clément-Lacroix P., Minet D. et al. A func-
18. Публикация МКРЗ 89. Основные анатомические и                    tional androgen receptor is not sufficient to allow estra-
    физиологические данные для использования в ра-                  diol to protect bone after gonadectomy in estradiol re-
    диационной безопасности: Референтные значе-                     ceptor–deficient mice // J. Clin. Invest. 2003. V. 111.
    ния. М.: Медкнига, 2007. 318 с.                                 № 9. P. 1319–1327.
19. Ильенко А.И., Крапивко Т.П. Экология животных в             35. Lean J.M., Davies J.T., Fuller K. et al. A crucial role for
    радиационном биогеоценозе. М.: Наука, 1989. 224 с.              thiol antioxidants in estrogen-deficiency bone loss //
20. Метаболизм стронция: сборник статей: Пер. с англ. /             J. Clin. Invest. 2003. V. 112. № 6. P. 915–923.
    Под ред. В.А. Книжникова, А.А. Моисеева. М.:                36. Bigham-Sadegh A., Oryan A. Selection of animal mo-
    Атомиздат, 1971. 344 с.                                         dels for pre-clinical strategies in evaluating the fracture
21. Osanov D.P., Panova V.P., Arefieva S.S. Evaluation of           healing, bone graft substitutes and bone tissue regene-
    age influence on accumulation and elimination rate of           ration and engineering // Connect Tissue Res. 2015.
    radioactive strontium // Health Phys. 1971. V. 21. № 2.         V. 56. № 3. P. 175–194.
    P. 205–210.                                                 37. Guo Y., Sun N., Duan X. et al. Estrogen Deficiency
22. Age-Related Factors in Radionuclide Metabolism and              Leads to Further Bone Loss in the Mandible of CKD
    Dosimetry // Radiation Protection Programme and                 Mice [Electronic resource] // PLoS ONE. 2016. V. 11.
    the Commissariat à l’Energie Atomique, Institut de              № 2. URL: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0148804
    Protection et de Sûreté Nucléaire, Fontenay-aux-Ros-        38. Петрухин И.В., Петрухин Н.И. Кормление домаш-
    es, France / Eds G.B. Gerber, H. Métivier, H. Smith.            них и декоративных животных: Cправ. кн. М.: Ни-
    1987.                                                           ва России, 1992. 336 с.
23. Баженов В.А., Булдаков Л.А., Василенко И.Я. и др.           39. Журавлев В.Ф. Токсикология радиоактивных ве-
    Вредные химические вещества. Радиоактивные                      ществ. М.: Энергоатомиздат, 1990. 336 с.
    вещества: Справочное издание. Л.: Химия, 1990.              40. Ильин Б.Н., Борисова В.В., Ветух В.А. Отдаленные
    464 с.                                                          биологические эффекты комбинированного дей-
24. Шведов В.Л., Аклеев А.В. Радиобиология стронция-                ствия радионуклидов различной тропности. М.:
    90. Челябинск: УНПЦ РМ, 2001. 298 с.                            Энергоатомиздат, 1991. 160 с.

                                       РАДИАЦИОННАЯ БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ                        том 59     №1      2019
МИНЕРАЛЬНАЯ ПЛОТНОСТЬ КОСТНОЙ ТКАНИ                                                        111

41. Smith J.A., van den Broek F.A.R., Cantor Martorell J.            on the basis of the Techa river data // Radiat. Environ.
    et al. Principles and practice in ethical review of animal       Biophys. 1997. V. 36. P. 25–29.
    experiments across Europe: Summary of the report of a        54. Любашевский Н.М., Шарыгин Л.М., Степина В.И.
    FELASA Working Group on Ethical Evaluation of                    Нативные поверхности и сорбционная способ-
    Animal Experiments // Lab. Animals. 2007. V. 41. № 2.            ность зрелой и формирующейся костной ткани //
    P. 143–160.                                                      Метаболизм радиоизотопов в животном организ-
42. Caring for animals aiming for better science: Directive          ме. Свердловск, 1974. С. 12–18.
    2010/63/EU on Protection of Animals used for Scien-
    tific Purposes / European Commission, 2010.                  55. Расин И.М., Пантелеев Л.И., Сарапульцев И.А. и др.
                                                                     Закономерности формирования минеральной ча-
43. Indritz A.N., Hegarty P.V.J. Problems in the choice of a         сти скелета у млекопитающих // Журн. общей био-
    representative bone for mineral analysis: evidence from          логии. 1981. Т. 42. № 1. С. 118–121.
    five bones of rats at two stages of development //
    J. Anat. 1980. V. 131. № 2. P. 317–320.                      56. Cabrera W.E., Schrooten I., De Broe M.E., D’Haese P.C.
                                                                     Strontium and bone // J. Bone Miner. Res. 1999. V. 14.
44. Стариченко В.И., Любашевский Н.М. Индивиду-                      № 5. P. 661–668.
    альные особенности аккумуляции 90Sr в организме
    двух видов серых полевок, обитающих на террито-              57. Стариченко В.И. Аккумуляция 90Sr у грызунов из
    рии Восточно-Уральского радиоактивного следа //                  зоны Восточно-Уральского радиоактивного следа:
    Радиац. биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38.                    влияние минеральной плотности кости // Радиац.
    Вып. 3. С. 375–383.                                              биология. Радиоэкология. 2018. Т. 58. № 2. С. 205–
                                                                     213.
45. Котова С.М., Карлова Н.А., Максимцева И.М., Жо-
    рина О.М. Снижение темпов созревания скелета –               58. Стариченко В.И., Любашевский Н.М., Модоров М.В.,
    неспецифическая реакция костной системы на                       Чибиряк М.В. 90Sr в скелете как метка миграцион-
    различные патологические состояния // Гений ор-                  ной активности мышевидных грызунов в зоне
    топедии. 2002. № 1. С. 163.                                      Воcточно-Уральского радиоактивного следа //
46. Диетология / Под ред. А.Ю. Барановского. 4-е изд.                Экология. 2014. № 3. С. 230–240.
    СПб.: Питер, 2012. 1024 с.                                   59. Slemenda C.W., Turner C.H., Peacock M. et al. The ge-
47. Nutrient Requirements of Laboratory Animals: Fourth              netics of proximal femur geometry, distribution of bone
    Revised Edition. Washington D.C.: National Academy               mass and bone mineral density // Osteoporos. Int.
    Press, 1995. 192 p.                                              1996. V. 6. № 2. P. 178–182.
48. Stover B.J. Metabolism of radioactive isotopes which         60. Rosen C.J., Beamer W.G., Donahue L.R. Defining the
    deposit mainly in the skeleton // Health Phys. 1959.             genetics of osteoporosis: using the mouse to understand
    V. 1. № 4. P. 373–378.                                           man // Osteoporos. Int. 2001. V. 12. № 10. P. 803–810.
49. Книжников В.А. Кальций и фтор. Радиационно-ги-               61. Касаткин Ю.Н., Поцыбина В.В., Левчук Д.И.
    гиенические аспекты. М.: Атомиздат, 1975. 199 с.                 Остеосцинтиграфия при системных поражениях
50. Толстых Е.И., Перемыслова Л.М., Шагина Н.Б. и др.                опорно-двигательного аппарата: параметры нор-
    Особенности накопления и выведения 90Sr у жите-                  мы, проблемы визуализации и анализа // Радиоло-
    лей Уральского региона в период 1957–1988 гг. //                 гия – практика. 2003. № 3. С. 31–37.
    Радиац. биология. Радиоэкология. 2005. Т. 45. № 4.           62. Love C., Din A.S., Tomas M.B. et al. Radionuclide bone
    С. 464–473.                                                      imaging: an illustrative review // RadioGraphics. 2003.
51. ICRP. Publication 88. Doses to the Embryo and Fetus              V. 23. № 2. P. 341–358.
    from Intakes of Radionuclides by the Mother // ICRP          63. Линденбратен Л.Д., Лясс Ф.М. Медицинская ра-
    Ann. 2001. V. 31 (1–3).                                          диология. 3-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина,
52. Shagina N.B., Tolstykh E.I., Fell T.P. et al. Strontium          1986. 368 с.
    biokinetic model for the lactating woman and transfer        64. Лихтарев И.А., Краснощекова Г.П., Доброскок А.И.,
    to breast milk: application to Techa River studies //            Синицкий Ю.Ф. Сообщение III. Биофизическая
    J. Radiol. Prot. 2015. V. 35. P. 677–694.                        интерпретация особенностей обмена стронция у
53. Tolstykh E.I., Kozheurov V.P., Vyushkova O.V., Degte-            лиц с нормальным и нарушенным развитием ске-
    va M.O. Analysis of strontium metabolism in humans               лета // Мед. радиология. 1972. Т. 17. № 1. С. 80–86.

   Mineral Density of Bone Tissue as a Deposit Factor for                                90Sr:   Experimental Data
                                                    V. I. Starichenko#
          Institute of Plant and Animal Ecology, Ural Branch, Russian Academy of Sciences, Yekaterinburg, Russia
                                            # E-mail: starichenko@ipae.uran.ru

       The study of the kinetics of bone-seeking radionuclides (in particular 90Sr) depending on the functional state
       of bone tissue is associated with the existing threat of radiation incidents and increasing use of medical radio-

   РАДИАЦИОННАЯ БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ                          том 59   №1      2019
112                                                СТАРИЧЕНКО

      nuclide preparations for medical and diagnostic purposes. The bone-seeking radionuclides, accumulating in
      the skeleton and remaining there for a long time, are sources of chronic internal radiation. The magnitude of
      their incorporation (resulting in accumulation and elimination processes) depends on a variety of endo- and
      exogenous factors. The most important endogenous factor is bone mineral density (BMD) – one of its main
      characteristics. In this paper, we study the dependence of the 90Sr accumulation on BMD after a single ad-
      ministration of radionuclide. The study was carried out in a laboratory experiment on mature CBA mice of
      different ages developing under standard vivarium conditions and under the influence of factors that modu-
      late the growth processes in the body. An inverse correlation (r = –0.77, p < 0.0001) is shown between the
      accumulation of 90Sr and the degree of mineralization of the skeleton. A comparison is made with the data
      previously obtained by the authors in the natural environment on two species of murine rodents living in a
      zone of the Eastern Ural Radioactive Trace under conditions of chronic intake of 90Sr.

      Keywords: 90Sr, skeleton, modifying factors of development, NEA mice, bone mineral density (BMD)

                                     РАДИАЦИОННАЯ БИОЛОГИЯ. РАДИОЭКОЛОГИЯ                       том 59    №1      2019
Вы также можете почитать