МЕТОДИЧЕСКОЕ ПОСОБИЕ ДЛЯ СТУДЕНТОВ

Страница создана Пётр Головин

Здоровье и фитнесс

Русский

Лайк
Поделиться
Встроить
На весь экран
Слайды
Скачать HTML
Скачать PDF
Жалоба

←

ПРОДОЛЖИТЬ ЧТЕНИЕ

→

Транскрипция содержимого страницы

Если ваш браузер не отображает страницу правильно, пожалуйста, читайте содержимое страницы ниже

МЕТОДИЧЕСКОЕ ПОСОБИЕ ДЛЯ СТУДЕНТОВ

«СБОРНИК АЛГОРИТМОВ МАНУАЛЬНЫХ НАВЫКОВ ДЛЯ
РЕШЕНИЯ ПРАКТИКООРИЕНТИРОВАННЫХ ЗАДАНИЙ»

                            МДК. 04. 01
Теория и практика лабораторных микробиологических и иммунологических
                             исследований

       для специальности ___31.02.03 _Лбораторная диагностика

                            Санкт-Петербург
                                2018 г.

                                                                   1

РАССМОТРЕНО и ОДОБРЕНО

специальной цикловой методической комиссией

Протокол №____

от "_____"________________20___г.

Председатель специальной ЦМК ______Ница Н.А._________

Авторы:

                 преподаватель                Иванова И.Ф.
                  (занимаемая должность)        (инициалы, фамилия)

                 преподаватель                 Саенко Т.П.
                 (занимаемая должность)        (инициалы, фамилия)

                                                                      2

СОДЕРЖАНИЕ

1. Пояснительная записка………………………………… стр. 4
2. Алгоритм мануальных действий к задаче: Приготовить мазок
культуры с плотной питательной среды………………. стр. 5
3. Алгоритм мануальных действий к задаче: Дифференциальный метод
окраски: окраска по Граму……………………………… стр. 7
4. Алгоритм мануальных действий к задаче: Иммерсионная
микроскопия……………………………………………….. стр.8
5. Алгоритм мануальных действий к задаче: Посев газоном бак. петлей
на ч. Петри…………………………………………………. стр.9
6. Алгоритм мануальных действий к задаче: Определение
чувствительности возбудителя к антибиотикам методом
«стандартных дисков»……………………………… стр.11
7. Алгоритм мануальных действий к задаче: Посев «газоном» на
скошенный агар (МПА) для накопления чистой
культуры…………………………………………………… стр.13
8. Алгоритм мануальных действий к задаче: Посев «газоном» на
скошенный полужидкий агар Клиглера (Ресселя; Олькеницкого)
для накопления чистой культуры и оценке биохимической
активности культуры………………………………………. стр.15
9. Алгоритм мануальных действий к задаче: Посев фекалий на среду
Эндо стеклянной палочкой………………………………… стр.17
10.Алгоритм мануальных действий к задаче: Посев исследуемого
материала на питательный агар открытым методом
тампоном………………………………………………………. стр.19
11.Алгоритм мануальных действий к задаче: Посев чистой культуры на
среды Гисса……………………………………………………. стр.21
12.Алгоритм мануальных действий к задаче: Количественный посев
исследуемого материала на питательный агар закрытым методом
колиброваной бак. петлей…………………………………… стр.24
13.Алгоритм мануальных действий к задаче: Посев гноя на желточно-
солевой агар шпателем………………………………………. стр.26
14.Алгоритм мануальных действий к задаче: Выполнить
ориентировочную реакцию агглютинации с целью
сероидентификации………………………………………….. стр.28
15.Алгоритм мануальных действий к задаче: посев исследуемого
материала в пробирку на среду Вильсона-Блера для выделения
анаэробов……………………………………………..……… стр.31

ПОЯСНИТЕЛЬНАЯ ЗАПИСКА
Основная цель Сборника – Помочь студентам по специальности
31.02.03 Лабораторная диагностика сформировать практические навыки и
умения для выполнения микроскопических, бактериологических,
серологических, иммунологических, биологических методов исследования,
используемых при диагностике инфекционных болезней.
Данные алгоритмы могут использоваться для выполнения
самостоятельной работы студентов на занятиях и при подготовке к
квалификационному экзамену.
Коды умений, знаний, общих и профессиональных компетенций
ПК 4.1. Готовить рабочее место для проведения лабораторных
микробиологических исследований.
ПК 4.2. Проводить лабораторные микробиологические и
иммунологические исследования биологических материалов, проб
объектов внешней среды и пищевых продуктов; участвовать в
контроле качества.
ПК 4.3. Регистрировать результаты проведенных исследований.

ПК 4.4. Проводить утилизацию отработанного материала, дезинфекцию и
стерилизацию использованной лабораторной посуды,
инструментария, средств защиты
ОК 1. Понимать сущность и социальную значимость своей будущей
профессии, проявлять к ней устойчивый интерес.

ОК 4. Осуществлять поиск и использование информации, необходимой
для эффективного выполнения профессиональных
задач, профессионального и личностного развития.
ОК 5. Использовать информационно-коммуникационные технологии в
профессиональной деятельности.
ОК 10. Бережно относиться к историческому наследию и культурным
традициям народа, уважать социальные, культурные и
религиозные
различия.
ОК 11. Быть готовым брать на себя нравственные обязательства по
отношению к природе, обществу и человеку.

АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
к задаче: Приготовить мазок культуры с плотной питательной среды

1. Подготовка к работе:
- униформа (халат, колпак, сменная обувь)
- обработать руки гигиеническим способом
- высушить полотенцем
- кран закрыть этим же полотенцем
-надеть одноразовые перчатки и очки

2. Организация рабочего места:
- спиртовка (перед собой на расстоянии локтя)
-спички
- бак.петля (справа в стакане)
- физ. р-р (пробирка в штативе слева)
- предметное стекло (перед собой на салазках мили перевернутой ч.Петри)
- ч.П. с ростом (слева дном вверх)
- контейнер для сбора отходов класса Б

3. Выполнение манипуляций:
- стекло протереть спиртовой салфеткой
- промаркировать стекло
- стекло положить на салазки или перевернутую чашку Петри
- выбрать изолированную колонию на ч.Петри с ростом
- маркировка колонии по дну ч. Петри
- петлю прожаривают в пламени, держа ее как карандаш вертикально в
правой руке до ярко-оранжевого цвета. Проволоку прожигают до
держателя. Потом два три раза проводят держатель горизонтально через
пламя .
- Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки
(допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем) . (пробка
должна быть направлена наружу).
- Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
- Взять бак. петле й физ. раствор
- Нанести ф.р. на стекло
- Провести край пробирки и пробку через пламя,
- Закрыть пробирку
- Петлю прожечь в пламени, сначала горизонтально, потом - вертикально
до ярко-оранжевого цвета. Проволку прожигают до держателя. Два три
раза проводят горизонтально через пламя .
- петлю остудить на воздухе
- в левую руку взять дно ч.Петри с ростом
- отколоть от выбранной колонии кусочек культуры (очень маленький)
5

- дно поставить на место
  - Внести культуру в каплю физ. раствора и растереть на стекле
  - Петлю прожечь в пламени, держа ее горизонтально, чтобы сжечь остатки
  культуры. Затем как карандаш вертикально до ярко-оранжевого цвета. Два
  три раза проводят горизонтально через пламя. Петлю поставить в стакан
  держателем вниз
  - высушить мазок в теплом воздухе горелки
  - Фиксируют мазок в пламени горелки (проносят через пламя 3 сек.)

4. Завершение работы:
   - убрать на общий стол ч.П. с ростом
   - стекло с мазком положить в ванночку на общем столе
   - в тазу с дез. раствором замочить салазки или ч.Петри на которой
   готовили мазок
   - продезинфицировать рабочую поверхность: Нанести на рабочую
   поверхность обеззараживающий спрей. Тампоном протереть рабочую
   поверхность, поднимая все что стоит на столе
   - ветошь (вату) сбросить в контейнер для отходов класса Б
   - снять перчатки (правильно) и сбросить в контейнер для отходов класса Б
   - гигиеническим методом обработать руки
   - руки вытереть полотенцем и полотенцем закрыть кран.

                                                                          6

АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
    к задаче : Дифференциальный метод окраски: окраска по Граму

1. Подготовка к работе:
   - униформа (халат, колпак, сменная обувь)
   - обработать руки гигиеническим способом, высушить полотенцем
   -надеть одноразовые перчатки и очки
   Организация рабочего места:
   - клеёнка
   - ёмкость с «салазками»
   - пинцет в стакане или штативе
   - набор красителей по Граму.
   - фильтровальная бумага
   - емкость для водой для смывания красителей
   - препарат (фиксированный мазок)
2. Манипуляции:
    На фиксированный мазок, наложить фильтровальную бумагу
    на фильтровальную бумагу наносят карболовый раствор
      генцианвиолета на 2—минуты.
    аккуратно удаляют фильтровальную бумагу пинцетом. Избыток краски
      стряхнуть
    Мазок заливают раствором Люголя на 1минуту до почернения
      препарата
    Раствор сливают,
    На мазок наносят 96° этиловый спирт. Стекло покачивают в
      горизонтальной плоскости , пока мазок не обесцветится
      (приблизительно 15—40 секунд).
    Тщательно промывают водой, держа стекло наклонно 1—2 мин.
    Воду как следует стряхнуть
    Дополнительно окрашивают фуксином (2—5 мин)
    Промыть в проточной воде
    Высушить фильтровальной бумагой.
Завершение работы:
                                                                    7

- Окрашенный мазок положить в емкость для мазков на общем столе
- жидкость после окраски слить в спец. контейнер.
- убрать ёмкость с «салазками» в таз с дез. раствором
- убрать красители
- дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую
поверхность обеззараживающий спрей. Тампоном протереть рабочую
поверхность, поднимая все что стоит на столе
- ветошь (вату) сбросить в контейнер для отходов класса Б
- снять перчатки (правильно) и сбросить в контейнер для отходов класса Б
- гигиеническим методом обработать руки
- руки вытереть полотенцем и полотенцем закрыть кран.
АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
к задаче: Иммерсионная микроскопия

1. Подготовка к работе:
- униформа (халат, колпак, сменная обувь)
- Гигиеническим методом обработать руки
- высушить полотенцем
- кран закрыть этим же полотенцем
- надеть одноразовые перчатки

2. Организация рабочего места:
- Двумя руками взять микроскоп и поставить его на рабочее место, развернув
предметным столиком к себе
- Подключить к сети
- Включить осветитель
3. Манипуляции:
1. установить микроскоп на малое увеличение;
2. установить препарат на столик;
3. Вначале под малым увеличением микроскопа определяют на препарате
участок микроскопирования
4. Не снимая стекла, опустить столик нанести каплю масла на препарат;
5. установить иммерсионный объектив;
6. опустить объектив в каплю масла при помощи макровинта;
7. наблюдая в окуляр вращать макровинт до появления изображения;
8. микровинтом установить более четкое изображение;
9. провести микроскопию мазка
4. Завершение работы
1. Опустить столик, снять препарат, перевести револьвер на малое
увеличение и очистить иммерсионный объектив от масла;
2. протереть спиртовой салфеткой весь микроскоп и предметный
столик. Салфетку (ветошь) сбросить в контейнер для отходов класса Б.
3. установить микроскоп в нейтральное положение (малое увеличение,
тубус вниз).
8

4. Стекло вытереть от иммерсии и сбросить в дез. Р-р.
5. Обработать рабочее место
6. Снять перчатки и сбросить их в контейнер
7. Гигиеническим методом обработать руки
8. высушить полотенцем
9. кран закрыть этим же полотенцем
10.После микроскопии занести результаты в журнал или бланк. Указать:
ФИО лаборанта? шифр, дату, что выявлено: тинкториальные свойства,
форма, размер ?, взаиморасположение м.к. в препарате

АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
к задаче: Посев газоном бак. петлей на ч. Петри

Организация рабочего места:
Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)
Бактериологическая петля в стакане (справа)
Ч. Петри со стерильной питательной средой (слева, дном вверх)
Пробирка с ростом на скосе (слева в штативе)
Емкость с дез. раствором
Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

 Левой рукой взять дно ч. Петри и густо нанести штрихи на 1 /2 площади
(штрихи должны идти от ребра до ребра чашки).
 Не выпуская бак. петлю, дно чашки повернуть пальцами левой руки на
90 градусов и еще раз густо нанести штрихи на 1 /2 площади.
 Не выпуская бак. петлю, дно чашки еще раз повернуть пальцами левой
руки на 90 градусов и еще раз густо нанести штрихи на 1 /2 площади.
 В третий раз повернуть дно чашки на 90 градусов раз густо нанести
штрихи на 1 /2 площади.
 Петлю прожаривают в пламени, держа ее горизонтально, чтобы сжечь
остатки культуры. Затем как карандаш вертикально до ярко-оранжевого
цвета. Два три раза проводят горизонтально через пламя .
 Промаркировать посев по дну

3. Завершение работы:
- убрать посев в термостат дном вверх
- пробирку с ростом на скосе убрать на общий стол для дальнейшей
утилизации
- дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую
поверхность обеззараживающий спрей. Тампоном протереть рабочую
поверхность, поднимая все, что стоит на столе.
- Снять перчатки и сбросить их в контейнер
- Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран
закрыть этим же полотенцем

АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
к задаче: Определение чувствительности возбудителя к антибиотикам
методом «стандартных дисков».
1. Подготовка к работе:
- униформа (халат, колпак, сменная обувь)
- Гигиеническим методом обработать руки
- высушить полотенцем
- кран закрыть этим же полотенцем
- надеть одноразовые перчатки
Организация рабочего места:
Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)
Бактериологическая петля в стакане (справа)
Пинцет в стакане
Ч. Петри с ростом чистой культуры в виде «газона» (слева, дном вверх)
Набор флаконов с антибиотиками
Емкость с дез. раствором
Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места
2. Манипуляции:
1. В правую руку взять пинцет и пронести бранши через пламя 2-3 раза
2. Флакон с дисками удерживают в левой руке 3,4,5 плацами, а
указательным и большим пальцами этой же руки открывают пробку на
флаконе
3. После изъятия пинцетом диска открытый флакон проносят через пламя
и закрывают пробку
4. В левую руку берут дно ч.Петри с засеянным газоном накладывают диск
и слегка прижимают его пинцетом. Диски накладывать на 2 см от ребра
чашки
5. Дно ставят на место. Повторяют процедуру
6. Перед каждым наложением диска пинцет фламбируют
На одну чашку накладывают 6 – 8 дисков

3. Завершение работы:
    - убрать посев в термостат дном вверх
    - пробирку с ростом на скосе убрать на общий стол для дальнейшей
    утилизации
    - дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую
    поверхность обеззараживающий спрей. Тампоном протереть рабочую
    поверхность, поднимая все, что стоит на столе.
- Снять перчатки и сбросить их в контейнер
- Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран
закрыть этим же полотенцем

                                                                       12

АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
        к задаче: Посев «газоном» на скошенный агар (МПА) для накопления
                                  чистой культуры

        1. Подготовка к работе:
        - униформа (халат, колпак, сменная обувь)
        - Гигиеническим методом обработать руки
        - высушить полотенцем
        - кран закрыть этим же полотенцем
        - надеть одноразовые перчатки

        Организация рабочего места:
         Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)
        Бактериологическая петля в стакане (справа)
        Ч. Петри с ростом (слева, дном вверх)
        Пробирка со стерильным скосом МПА(слева, в штативе)
        Емкость с дез. раствором
        Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

        2. Манипуляции:
         Оценить рост ан ч.Петри с целью выбора изолированной колонии
         Промаркировать изолированную колонию по дну
        Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке, до
         ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю проволоку до
         держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально через пламя.
        Остудить петлю на воздухе
        Левой рукой взять дно ч. Петри
        Отколоть кусочек колонии
        Поставить дно на место

                                                                               13

 Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки
   (допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем) .
   (пробка должна быть направлена наружу).
  Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
  Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо
   был виден скос
  Петлю вводят в пробирку до основания скоса и смешивают культуру с
   конденсатом
  Частыми штрихами засевают всю поверхность скоса. (Петлю водят
   частым зигзагом от стенки к стенке)
  Вынимают петлю, не касаясь стенок пробирки.
  Пронести через пламя пробку и верх пробирки. Закрыть пробирку и
   поставить в штатив.
  Петлю прожигают в пламени, держа ее горизонтально, чтобы сжечь
   остатки культуры. Затем как карандаш вертикально до ярко-оранжевого
   цвета. Два три раза проводят горизонтально через пламя .
  Промаркировать посев

3. Завершение работы:
    - убрать посев в термостат
    - чашку с ростом убрать на общий стол для дальнейшей утилизации
    - дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую
    поверхность обеззараживающий спрей.
    - Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все, что стоит на
    столе.
    - Тампон сбросить в контейнер для отходов класса Б
- Снять правильно перчатки и сбросить их в контейнер для отходов класса Б
- Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран
закрыть этим же полотенцем

                                                                        14

АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
к задаче: Посев «газоном» на скошенный полужидкий агар Клиглера
(Ресселя; Олькеницкого) для накопления чистой культуры и оценке
                биохимической активности культуры.

                  1. Подготовка к работе:
- униформа (халат, колпак, сменная обувь)
- Гигиеническим методом обработать руки
- высушить полотенцем
- кран закрыть этим же полотенцем
- надеть одноразовые перчатки

Организация рабочего места:
 Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)
Бактериологическая петля в стакане (с права)
Ч. Петри с ростом (слева, дном вверх)
Пробирка со стерильным скосом среды Клиглера (слева в штативе)
Емкость с дез. раствором
Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

                2. Манипуляции:
                                                                  15

 Оценить рост ан ч.Петри с целью выбора изолированной колонии
         Промаркировать изолированную колонию по дну
        Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке, до
         ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю проволоку до
         держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально через пламя.
        Остудить петлю на воздухе
        Левой рукой взять дно ч. Петри
        Отколоть кусочек колонии
        Поставить дно на место
        Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки
         (допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем) .
         (пробка должна быть направлена наружу).
        Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
        Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо
         был виден скос
        Петлю вводят в пробирку до основания скоса и смешивают культуру с
         конденсатом
        Провести по скосу прямую линию (от основания к вершине скоса)
        Сделать укол в столбик не до дна
        Частыми штрихами засевают всю поверхность скоса. (Петлю водят
         частым зигзагом от стенки к стенке)
        Вынимают петлю, не касаясь стенок пробирки.
        Пронести через пламя пробку и верх пробирки. Закрыть пробирку и
         поставить в штатив.
        Петлю прожигают в пламени, держа ее горизонтально, чтобы сжечь
         остатки культуры. Затем как карандаш вертикально до ярко-оранжевого
         цвета. Два три раза проводят горизонтально через пламя .
        Промаркировать посев

3. Завершение работы:
    - убрать посев в термостат
    - чашку с ростом убрать на общий стол для дальнейшей утилизации
    - дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую
    поверхность обеззараживающий спрей.
    - Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все, что стоит на
    столе.
    - Тампон сбросить в контейнер для отходов класса Б
- Снять правильно перчатки и сбросить их в контейнер для отходов класса Б
- Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран
закрыть этим же полотенцем

                                                                            16

1

                АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
       к задаче: Посев фекалий на среду Эндо стеклянной палочкой.
   1. Подготовка к работе:
   - униформа (халат, колпак, сменная обувь)
  - Гигиеническим способом обработать руки (можно с использованием дез.
салфеток)
    - Высушить руки и надеть одноразовые перчатки

  Организация рабочего места:
   Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)
   Спички
   Стерильная стеклянная палочка (завернута в бумагу, лежит справа)
   Среда Эндо (розовая среда, поставить дном вверх слева)
   Емкость с дез. раствором
   Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

   2. Манипуляции:
 1. Развернуть палочку и взять ее как карандаш в правую руку (за верхнюю
    треть)

                                                                       17

2. Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки
(допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем) .
(пробка должна быть направлена наружу).
3. Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
4. Ввести палочку в исследуемый материал до дна, перемешать материал
5. Приподнять палочку над материалом и, не вынимая из пробирки
стряхнуть, чтобы материал не собирался в каплю
6. Пронести через пламя пробку и устье пробирки
7. Закрытую пробирку поставить в штатив
8. В левую руку взять дно ч. Петри со средой Эндо
9. Развернуть дно в сторону горения спиртовки
10.Сделать посевную площадку вращая палочку
11.Засеять материал одним из способов механического разобщения
(штрихами; зигзагом; по секторам; комбинированный и др.)
12.Палочку инфицированным концом погрузить в дез. Раствор
13.Промаркировать посев

3. Завершение работы:
- Посев поставить в термостат дном вверх
- убрать на общий стол ч.П. и исследуемый материал для последующей
утилизации
- дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую
поверхность обеззараживающий спрей. Тампоном протереть рабочую
поверхность

АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
к задаче: Посев исследуемого материала на питательный агар открытым
                          методом тампоном

         1. Подготовка к работе:
   - униформа (халат, колпак, сменная обувь)
    - Гигиеническим способом обработать руки (можно с использованием
дез. салфеток)
    - Высушить руки и надеть одноразовые перчатки
Организация рабочего места:
С левой стороны – штатив с биоматериалом и тупфером
ч. Петри с питательной средой поставить дном вверх
Приготовить спички и маркер
Перед собой - поставить спиртовку
         2. Манипуляции:
- Ч.Петри по дну промаркировать: написать номер, указанный на пробирке с
материалом и сегодняшнее число
- Зажечь спиртовку
                                                                       19

- Взять тупфер в левую руку, открыть тупфер, извлечь тампон за пробку
указательным и большим пальцем правой руки, не касаясь той части, которая
будет контактировать с инокулятом или питательной средой. Тампон держат
за пробку как карандаш.
- В левую руку взять пробирку с биоматериалом
- Открыть пробку мизинцем и безымянным пальцами правой руки (пробка не
должна быть зажата в кулаке) .Допускается вынимать пробку мизинцем и
мякотью ладони правой руки .
- Пронести через пламя край пробирки и ту часть пробки, которая входит в
горлышко пробирки.
- Погрузить тампон в биоматериал до дна пробирки и тщательно
суспензировать его
- Приподнять тампон над поверхностью жидкости и слегка отжать тампон о
стенки пробирки
- Вынуть тампон из пробирки
- Пронести через пламя край пробирки и ту часть пробки, которая входит в
горлышко пробирки
- Закрыть пробирку
- Левой рукой поставить пробирку с биоматериалом в штатив
- Левой рукой взять дно ч. Петри
- Развернуть дно в сторону горения спиртовки
- Сделать посевную площадку: нанести биоматериал, вращая тампон, на
поверхность питательной среды у края чашки площадью 2 -3 см2
- Оставшийся на тампоне материал засеять штрихами, или зигзагом, или по
секторам (выбирает студент)
- Дно ч.Петри поставить на место – в крышку (посевом вниз)
- Использованный тампон поместить в тупфер
- Тупфер сбросить в контейнер для отходов класса Б
       3. Завершение работы:
- Посев поставить в термостат дном вверх
- штатив с биоматериалом поставить на стол для сброса.
- Обработать рабочее место дез. салфетками (или с помощью дез. раствора и
ваты/ветоши )
- Салфетки/вату сбросить в контейнер для отходов класса Б
- Снять перчатки
- Сбросить перчатки в контейнер для отходов класса Б
- Обработать руки гигиеническим методом

                                                                       20

АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
          к задаче: Посев чистой культуры на среды Гисса

 3. Подготовка к работе:
- униформа (халат, колпак, сменная обувь)
- Гигиеническим методом обработать руки
- высушить полотенцем
- кран закрыть этим же полотенцем
- надеть одноразовые перчатки

Организация рабочего места:
Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)
Бактериологическая петля в стакане (справа)
Пробирка с ростом на скосе (слева в штативе)
Штатив со средами Гисса (Пять пробирок с жидкостью)
                                                           21

Емкость с дез. раствором
Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

11.Манипуляции:
 Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке, до
ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю проволоку до
держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально через пламя.
 Взять в левую руку пробирку с ростом на скосе, вынуть пробку 4 и 5
пальцами правой руки (допускается зажать пробку между мякотью
ладони и мизинцем) . (Пробка должна быть направлена наружу).
 Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
 Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо
был виден скос
 Петлю вводят в пробирку и охлаждают ее, касаясь стенки.
 Снимают петлей поверхностный рост.
 Вынимают петлю, не касаясь стенок пробирки.
 Пронести через пламя пробку и верх пробирки. Закрыть пробирку и
поставить в штатив.
 Взять в левую руку пробирку со следующей питательной средой Гисса,
вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки (допускается зажать пробку
между мякотью ладони и мизинцем) . (Пробка должна быть направлена
наружу).
 Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
 Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы
образовался скос жидкости
 Внести культуру на бак. петле и снять ее на стекло, противоположное
скосу жидкости.
 Не вынимая петлю повернуть пробирку пальцами на 1800 , чтобы
культура оказалась под жидкостью.
 Смыть культуру со стекла бак. петлей.
 Аккуратно вынуть петлю из пробирки, чтобы не брызнуло
 Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
 Поставить пробирку в штатив

 Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке.
Сначала горизонтально до ярко-оранжевого цвета. Затем вертикально.
Необходимо прожечь всю проволоку до держателя. Затем два - три раза
проводят горизонтально через пламя.

 Взять в левую руку пробирку с ростом на скосе, вынуть пробку 4 и 5
пальцами правой руки (допускается зажать пробку между мякотью
ладони и мизинцем) . (Пробка должна быть направлена наружу).
 Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
 Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо
был виден скос
 Петлю вводят в пробирку и охлаждают ее, касаясь стенки.
 Снимают петлей поверхностный рост.
 Вынимают петлю, не касаясь стенок пробирки.
 Пронести через пламя пробку и верх пробирки. Закрыть пробирку и
поставить в штатив.
 Взять в левую руку пробирку с питательной средой Гисса, вынуть
пробку 4 и 5 пальцами правой руки (допускается зажать пробку между
мякотью ладони и мизинцем) . (Пробка должна быть направлена
наружу).
 Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
 Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы
образовался скос жидкости
 Внести культуру на бак. петле и снять ее на стекло, противоположное
скосу жидкости.
 Не вынимая петлю повернуть пробирку пальцами на 1800 , чтобы
культура оказалась под жидкостью.
 Смыть культуру со стекла бак. петлей.
 Аккуратно вынуть петлю из пробирки, чтобы не брызнуло
 Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
 Поставить пробирку в штатив
 Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке.
Сначала горизонтально до ярко-оранжевого цвета. Затем вертикально.
Необходимо прожечь всю проволоку до держателя. Затем два - три раза
проводят горизонтально через пламя.
ДЕЙСТВИЯ ПОВТОРЯЮТ, ПОКА НЕ БУДУТ ЗАСЕЯНЫ ВСЕ
СРЕДЫ.

3. Завершение работы:
23

- Посев поставить в термостат
- штатив с биоматериалом поставить на стол для сброса.
- Обработать рабочее место дез. салфетками (или с помощью дез. раствора и
ваты/ветоши )
- Салфетки/вату сбросить в контейнер для отходов класса Б
- Снять перчатки
- Сбросить перчатки в контейнер для отходов класса Б
- Обработать руки гигиеническим методом

              АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
      к задаче: Количественный посев исследуемого материала на
   питательный агар закрытым методом калиброванной бак. петлей

   1. Подготовка к работе:
  - униформа (халат, колпак, сменная обувь)
  - Гигиеническим методом обработать руки
  - высушить полотенцем
  - кран закрыть этим же полотенцем
  - надеть одноразовые перчатки
  Организация рабочего места:
  Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)
  Бактериологическая петля диаметром 2 мм в стакане (справа)
  Ч. Петри со стерильной питательной средой (слева, дном вниз)
                                                                        24

Пробирка с исследуемым материалом (слева в штативе)
Емкость с дез. раствором
Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места
2. Манипуляции:
 Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке, до
ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю проволоку до
держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально через пламя.
 Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки
(допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем) .
(пробка должна быть направлена наружу).
 Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
 Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо
была видена жидкость
 Петлю вводят в пробирку и охлаждают ее, касаясь стенки.
 Берут петлей жидкость (на петле должна быть пленочка)
 Вынимают петлю, не касаясь стенок пробирки, чтобы не сбросить
пленку.
 Пронести через пламя пробку и верх пробирки.
 Закрыть пробирку и поставить в штатив.
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ БЕРЕТСЯ ТОЛЬКО 1 РАЗ
 Приоткрыть крышку в сторону горения спиртовки
 Вести бак. петлю под крышку и сделать 40 штрихов на площади 2-3 см2
- сектор А
 Закрыть крышку.
 Прожечь бак. петлю.
 Остудить бак. петлю на воздухе
 Приоткрыть крышку ч. Петри
 Ввести бак. петлю и провести 4 параллельных штриха от сектора А –
это сектор 1
 Закрыть крышку.
 Прожечь бак. петлю.
 Остудить бак. петлю на воздухе
 Приоткрыть крышку ч. Петри
 Ввести бак. петлю и провести 4 параллельных штриха от сектора 1 –
сектор 2
 Закрыть крышку.
 Прожечь бак. петлю.
 Остудить бак. петлю на воздухе
 Приоткрыть крышку ч. Петри
 Ввести бак. петлю и провести 4 параллельных штриха от сектора 2
 ВАЖНО: линии сектора 3 не должны касаться сектора А
 Пронести через пламя пробку и верх пробирки. Закрыть пробирку и
поставить в штатив.
25

 Петлю прожигают в пламени, держа ее горизонтально, чтобы сжечь
    остатки культуры. Затем как карандаш вертикально до ярко-
    оранжевого цвета. Два три раза проводят горизонтально через пламя .
   Промаркировать посев

3. Завершение работы:
    - убрать посев в термостат дном вверх
    - пробирку с исследуемым материалом убрать на общий стол для
    дальнейшей утилизации
    - дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую
    поверхность обеззараживающий спрей.
    - Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все, что стоит на
    столе.
    - Тампон сбросить в контейнер для отходов класса Б
- Снять правильно перчатки и сбросить их в контейнер для отходов класса Б
- Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран
закрыть этим же полотенцем

              АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
      для задачи Посев гноя на желточно - солевой агар шпателем

     1. Подготовка к работе:
  - униформа (халат, колпак, сменная обувь)
  - Гигиеническим методом обработать руки
  - высушить полотенцем
  - кран закрыть этим же полотенцем
  - надеть одноразовые перчатки

  Организация рабочего места:
  Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)
  Бактериологическая петля в стакане (справа)

                                                                          26

Стерильный шпатель (справа или поставлен в стакан, или лежит
завернутый в бумагу) Обратить внимание: нельзя брать в руки посевную
сторону шпателя
Ч. Петри со стерильной питательной средой желтого цвета (слева, дном
вниз)
Пробирка с исследуемым материалом (слева в штативе)
Емкость с дез. раствором
Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

2. Манипуляции:
 Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке, до
ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю проволоку до
держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально через пламя.
 Взять в левую руку пробирку, вынуть пробку 4 и 5 пальцами правой руки
(допускается зажать пробку между мякотью ладони и мизинцем) .
(пробка должна быть направлена наружу).
 Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
 Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо
была видена жидкость
 Петлю вводят в пробирку и охлаждают ее, касаясь стенки.
 Берут петлей жидкость (на петле должна быть пленочка)
 Вынимают петлю, не касаясь стенок пробирки, чтобы не сбросить
пленку.
 Пронести через пламя пробку и верх пробирки.
 Закрыть пробирку и поставить в штатив.
 Приоткрыть крышку в сторону горения спиртовки
 Вести бак. петлю и сделать посевную площадку 2-3 см2 у ребра дна
 Закрыть крышку.
 Прожечь бак. петлю.
 Поставить бак. петлю на место
 Приоткрыть крышку в сторону горения спиртовки
 Ввести шпатель под крышку и расположить его на посевной площадке
прямым углом к ребру чашки
 Втереть материал в питательную среду (круг шпателем делают один
раз)
 Сбросить шпатель в дез. раствор инфицированным концом
 закрыть чашку
 Перевернуть чашку дном вверх
 Промаркировать посев

3. Завершение работы:
   - убрать посев в термостат дном вверх
   - пробирку с исследуемым материалом убрать на общий стол для
    дальнейшей утилизации
   - дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую
    поверхность обеззараживающий спрей.
   - Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все, что стоит
    на столе.
   - Тампон сбросить в контейнер для отходов класса Б
   - Снять правильно перчатки и сбросить их в контейнер для отходов
    класса Б
   - Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран
    закрыть этим же полотенцем

            АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
для задачи Выполнить ориентировочную реакцию агглютинации с
                  целью сероидентификации

   1. Подготовка к работе:
- униформа (халат, колпак, сменная обувь)
- Гигиеническим методом обработать руки
- высушить полотенцем
                                                                    28

- кран закрыть этим же полотенцем
 - надеть одноразовые перчатки

 Организация рабочего места:
 Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)
 Бактериологическая петля в стакане (справа)
 Пробирка с ростом на скошенном агаре (слева в штативе)
 Штатив с пробирками с диагностической сывороткой и физ. раствором (с
 левой стороны)
 Предметное стекло перед собой (стекло положить на перевернутую ч.П.)
 Маркер
 Емкость с дез. раствором
 Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

    2. Манипуляции:

 Промаркировать стекло с обратной стороны: «О» «Кат» «Каг »
 Трубочками нанести капли: в «О» а «Кат» - диагностическую сыворотку
  В «Каг» - физ. раствор
 Петлю прожечь в пламени, держа ее как карандаш в правой руке, до
  ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю проволоку до
  держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально через пламя.
 Взять в левую руку пробирку с ростом на скосе, вынуть пробку 4 и 5
  пальцами правой руки (допускается зажать пробку между мякотью
  ладони и мизинцем) . (пробка должна быть направлена наружу).
 Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки
 Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо
  был виден рост на скосе
 Петлю вводят в пробирку и охлаждают ее, касаясь стенки.
 Берут петлей немного чистой культуры
 Вынуть петлю из пробирки
 Пронести через пламя пробку и верх пробирки.
 Закрыть пробирку и поставить в штатив.
 Внести культуру в «Каг» растереть
 Петлю прожечь в пламени, держа ее сначала горизонтально потом
  вертикально, до ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю
  проволоку до держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально
  через пламя
 Оценить суспензию в «Каг». Если капля мутная то
 Взять в левую руку пробирку с ростом на скосе, вынуть пробку 4 и 5
  пальцами правой руки (допускается зажать пробку между мякотью
  ладони и мизинцем) . (пробка должна быть направлена наружу).
 Верхний край пробирки и пробку проносят через пламя горелки

                                                                    29

 Положить пробирку на большой палец левой руки так, чтобы хорошо
   был виден рост на скосе
  Петлю вводят в пробирку и охлаждают ее, касаясь стенки.
  Берут петлей немного чистой культуры
  Вынуть петлю из пробирки
  Пронести через пламя пробку и верх пробирки.
  Закрыть пробирку пробкой и поставить в штатив.
  Внести культуру в «О» растереть
  Петлю прожечь в пламени, держа ее сначала горизонтально потом
   вертикально, до ярко-оранжевого цвета. Необходимо прожечь всю
   проволоку до держателя. Затем два - три раза проводят горизонтально
   через пламя
  1 минуту покачивать стекло в горизонтальной плоскости так, чтобы
   капли не слились
 Учитывают результат: Учет начинают с контроля Ag: КAg – мутный, КAt
  – прозрачный, “О” (+) просветление и образование хлопьев; (-) капля
  мутная, просветление отсутствует
                 диагностическая сыворотка

             чистая культура

3. Завершение работы:
     - стекло сбросить в дез. раствор
     - пробирку с исследуемым материалом убрать на общий стол для
      дальнейшей утилизации
     Штатив с сывороткой и физ. раствором поставить на общий стол
     - дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую
      поверхность обеззараживающий спрей.
     - Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все, что стоит
      на столе.
     - Тампон сбросить в контейнер для отходов класса Б
     - Снять правильно перчатки и сбросить их в контейнер для отходов
      класса Б
     - Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран
      закрыть этим же полотенцем
                                                                      30

АЛГОРИТМ МАНУАЛЬНЫХ ДЕЙСТВИЙ
для задачи : посев исследуемого материала в пробирку на среду
Вильсона-Блера для выделения анаэробов.

  1. Подготовка к работе:
  - униформа (халат, колпак, сменная обувь)
  - Гигиеническим методом обработать руки
                                                           31

- высушить полотенцем
- кран закрыть этим же полотенцем
- надеть одноразовые перчатки

Организация рабочего места:
Спиртовая горелка (перед собой на расстоянии локтя)
Стерильная пипетка с грушей.(или дозатор на 1 мл)
Пробирка со стерильной расплавленной питательной средой (слева в
штативе)
Пробирка с исследуемым материалом - жидким (слева в штативе)
Пробирка пустая стерильная закрытая пробкой (слева в штативе)
Емкость с дез. раствором
Спрей с дез. раствором для обработки рабочего места

2. Манипуляции:
    В правую руку взять пипетку с грушей
    В левую руку взять две пробирки;: пустую и с биоматериалом
    Мизинцем и безымянным пальцем правой руки открыть обе
     пробирки пробками наружу
    Пронести через пламя края пробирок и обе пробки

   Пипеткой перенести 1 м л исследуемого материала в пустую
    пробирку
   Пронести через пламя края пробирок и обе пробки
   Закрыть пробирки
   Поставить пробирки левой рукой в штатив
   Пипетку освободить от груши и погрузить носиком в дез. раствор
   В левую руку взять пробирку с 1 мл исследуемого материала

                                                                     32

 В правую руку взять пробирку с расплавленным и остуженным
       агаром
      Открыть пробирку в левой руке мизинцем и мякотью ладони правой
       руки; пробирку в правой руке мизинцем и мякотью ладони левой
       руки
      Пронести через пламя края пробирок и пробки поочередно
      Перелить расплавленный ага в пробирку с биоматериалом
      Пронести через пламя края пробирок и пробки поочередно
      Закрыть пробирки и поставить в штатив
      Промаркировать посев

3. Завершение работы:
     - пипетку опустить в дез. раствор инфицированным концом
     - пробирку с исследуемым материалом и пустую пробирку из-под агара
      убрать на общий стол для дальнейшей утилизации
                                                                      33

 Посев поставить в термостат
 - дезинфицировать рабочую поверхность: нанести на рабочую
  поверхность обеззараживающий спрей.
 - Тампоном протереть рабочую поверхность, поднимая все, что стоит
  на столе.
 - Тампон сбросить в контейнер для отходов класса Б
 - Снять правильно перчатки и сбросить их в контейнер для отходов
  класса Б
 - Гигиеническим методом обработать руки высушить полотенцем кран
  закрыть этим же полотенцем

                                                                  34

Вы также можете почитать