Боль и дистресс у лабораторных грызунов и лагоморфов
←
→
Транскрипция содержимого страницы
Если ваш браузер не отображает страницу правильно, пожалуйста, читайте содержимое страницы ниже
Боль и дистресс у лабораторных грызунов и лагоморфов Отчет Рабочей группы по боли и дистрессу Федерации Европейских научных ассоциаций по лабораторным животным (FELASA), принятый Советом директоров FELASA в ноябре 1992 года Содержание Введение Раздел I Определения боли, дистресса и страданий Раздел II Механизмы боли Раздел III Измерение анальгезии и анальгезии, индуцированные условиями среды Раздел IV Чувствительность тканей и органов к боли Раздел V Последствия боли и дистресса Раздел VI Юридические обязательства Раздел VII Источники боли и дистресса Раздел VIII Признаки боли и дистресса Раздел IX Классификация степени выраженности боли и дистресса у животных Выводы Библиография Введение Рабочая группа провела рассмотрение вопроса о характере боли и дистресса у лабораторных грызунов и лагоморфов, поскольку в подавляющем большинстве случаев именно они используются в экспериментах. Для того, чтобы сделать документ как можно более практичным и легким для чтения, в текст включено минимальное количество ссылок. Более подробная библиография исходных материалов, использованных для консультаций Рабочей группы, может быть получена от д-ра В. Бауманса (Rijksuniver- siteit Utrecht, Bureau Proefdierdeskundige, PO Box 80.166, 3508 TD Utrecht, Netherlands). Авторы старались соблюдать последовательность при использовании определений для тех понятий, которые иногда кажутся «расплывчатыми», но при этом часто встречаются в данной тематической области. Информация представлена по разделам, хотя в некоторых случаях эти разделы дополняют друг друга. Неотъемлемой частью гуманного отношения является желание довести до абсолютного минимума боль и дистресс у лабораторных животных. Это – цель, которая признается в европейском и национальном законодательствах. Например, официальное Руководство (Министерство внутренних дел, 1990 год), которое прилагается к Закону о животных (научных процедурах) Соединенного королевства 1986 года, требует от владельцев лицензий «минимизировать любую боль, страдания или дистресс». Однако необходимо отметить, что механизмы боли и дистресса, в основном, призваны служить для удаления животных от потенциальных источников повреждения тканей или гибели. Животные, у которых такие механизмы отсутствуют, не могут долго выживать в природных условиях. Кроме того, наше желание устранить стимулы или ситуации, вызывающие боль и дистресс, могут легко приводить к депривации, самоповреждению и стерильности среды (отсутствие «обогащения» среды), если доходить до крайностей (Brain 1992, Dantzer 1991).
I. Определения боли,
дистресса и страдания
Боль, дистресс и страдание – термины в основном, характеризующие состояние
человеческой психики, ощущения и опыт людей. Трудно перенести определения,
характеризующие состояние «разума», на сравнимые состояния лабораторных животных.
Исследователи должны быть знакомы со сложными концепциями боли, дистресса и
страданий и знать, как проводить распознавание, оценку, контроль и, предпочтительно,
предотвращение этих ситуаций у животных. Эта тема также широко обсуждалась Mor-
ton (1990). До настоящего времени не достигнуто консенсуса по определениям этих
терминов, но для целей настоящего документа будут использоваться нижеуказанные
определения.
Боль
Рабочее определение боли, опубликованное Международной ассоциацией по изучению
боли (1979): «боль – неприятный сенсорный и эмоциональный опыт, связанный с
фактическим или потенциальным повреждением, или описываемый с точки зрения
такого повреждения». Это и другие определения боли подчеркивают, что данное понятие
связано с опытом. Основываясь на физиологии и психологии можно сказать, что при
этом необходимо пробудить ощущения. В свою очередь, это означает, что животное
находится в сознании и что кора его головного мозга функционирует (находится в
состоянии готовности). Представляется, что это соответствует действительности, по
крайней мере, у млекопитающих. Также важно отметить следующее: когда имеется
впечатление, что животное испытывает боль, у этого животного проявляется реакция
на боль в форме некоторых изменений в поведении (раздел VIII).
Используемое в данном тексте определение боли ограничено понятием, обозначаемым
как физическая или ноцицептивная боль. Таким образом, еще одна важная особенность
заключается в том, что боль представляет собой ощущение или переживание
ноцицептивных стимулов, т.е. стимулов такого уровня, которые могут вызывать травму/
повреждение тканей или представлять угрозу их возникновения.
Дистресс
Определение дистресса имеется в Руководстве по распознаванию и оценке боли
у животных (Guidelines for the Recognition and Assessment of Pain in Animals, UFAW
1989). Оно звучит следующим образом: состояние, в котором животное затрачивает
значительные усилия или ресурсы для адаптивного ответа на проблемы, возникающие из
окружающей ситуации. Это определение очень похоже на определение эмоциональной
или психической боли (Spinell & Markowits 1987) и, возможно, лишь отражает различия
в английской и американской терминологии. Таким, образом, вызывающие дистресс
стимулы в какой-то степени представляют собой экстремальные значения или уровни
различных факторов, составляющих для животных окружающую среду. В их число
также входит поведение научных сотрудников и технического персонала, когда они
осуществляют уход за животными.
В настоящем документе термины «тревога», «фрустрация» или «депрессия» включены
в рамки определения дистресса. Это же относится и к «дискомфорту», который
рассматривается как легкая форма дистресса.
Когда предпринимаются попытки оценить уровни дистресса (легкой, средней или
тяжелой степени), важно понимать, что определенные состояния могут быть в большей
или меньшей степени стрессовыми для определенных животных, в зависимости от их
возможности и способности справляться с ситуацией. Чем лучше такие возможности и
способности, тем меньше степень тяжести дистресса.Страдание Страдание – особое состояние «психики», которое не идентично боли или дистрессу, но может стать их последствием. Физическая боль или дистресс могут приводить к страданиям, если они имеют достаточную интенсивность и продолжительность (или и то, и другое). Чем выше интенсивность, тем меньше времени требуется для того, чтобы боль или дистресс привели к страданиям. Страдания начинаются, когда боль или дистресс становятся невыносимыми для отдельного животного. Физическая боль при этом достигает уровня, выходящего за предел переносимости боли, или дистресс превосходит уровень, с которым животное может справиться. На этой стадии очевидны такие пагубные последствия, как замедление роста, нарушение размножения и неадекватный уход животных за собой. Представляется очевидным, что меры для предотвращения страдания включают поддержание любой возможной боли или дистресса в пределах уровней, которые животные могут выносить или справляться с ними. II. Механизмы боли Периферические структуры Ноцицептивные (связанные с болью) сигналы образуются в органах чувств, которые называют ноцицепторпми; в коже они соединены с тонкими миелинизированными Аδ- волокнами (скорость проведения: 4-30 м/сек) или немиелинизированными С-волокнами (скорость проведения: 0,4-2 м/сек). Существование двух видов афферентных волокон (они осуществляют передачу информации в центральную нервную систему) может объяснить, почему короткие кожные ноцицептивные стимулы могут вызывать двойное ощущение боли. Первая или быстро возникающая боль хорошо локализована и представляет собой четкое ощущение укола, вызванное активацией ноцицепторов, соединенных с Аδ-волокнами. Вторая или медленная боль представляет собой более рассеянное ощущение жжения («ноющая боль»), обусловленное активностью С- волокон. С-волокна составляют основную часть кожных ноцицептивных и практически всех висцеральных ноцицептивных афферентных волокон (Besson & Chaouch 1987, Campbell et al. 1989, Kitchell & Guibab 1990, Jeneskog 1991). По-видимому, несколько эндогенных веществ также участвуют в восприятии боли, связанной с повреждением тканей (травматическим или воспалительным). К ним относятся ионы калия (К+) и водорода (Н+), брадикинин, выделяемый поврежденными клетками, гистамин и серотонин, выделяемые дегранулированными тучными клетками, а также серотонин, образующийся вследствие аггрегации тромбоцитов. В процессе воспаления продуцируются некоторые простагландины и лейкотрины, которые воздействуют на ноцицепторы, что приводит к понижению порога их активации. Аδ- волокна и С-волокна также содержат нейропептиды, такие как субстнция Р, пептид, связанный с геном кальцитонина, и нейрокинин А, которые выделяются в центральных окончаниях спинного рога спинного мозга, а также в их периферических окончаниях. Эти субстанции задействованы в «нейрогенном воспалении», воздействуя через так называемые «аксонные рефлексы». Спинной рог Подавляющее большинство мельчайших афферентных нервных волокон достигают спинного мозга через задние корешки и разделяются на восходящие и нисходящие пучки, которые могут проходить через несколько сегментов в виде нервного пучка, а затем заканчиваются в сером веществе спинного рога спинного мозга. Два основных типа веществ, выделяющихся из нервных окончаний, возможно, выполняют функцию нейротрансмиттеров и нейромодуляторов. Это – стимулирующие аминоксилоты (напр., глутамат) и пептиды (субстанция Р и несколько других). Два основных класса
передающих клеток спинного рога напрямую или опосредованным образом активируются ноцицептивными входными структурами, «ноцицептивными специфическими» (NS) нейронами, которые активируются только ноцицептивными стимулами, и нейронами «широкого динамического диапазона» (WDR) или «конвергентными», которые до определенной степени также активируются не-ноцицептивными раздражителями. Как только ноцицептивное сообщение достигает центральной нервной системы, им начинают «заниматься» различные регулирующие механизмы. В их число входят сегментальная модуляция (супрессия) через толстые, миелинизированные кожные волокна, а также нисходящая модуляция через регулирующие системы супраспинального происхождения, в основном, от околоводопроводного серого вещества ствола головного мозга. Другая система, по-видимому, имеющая широкомасштабное действие, в которой один ноцицептивный входной сигнал может ингибировать другой (даже удаленный ноцицептивный входной сигнал) через сегментальные и супраспинальные компоненты, называется «диффузный ноцицептивный тормозной контроль (DNIC). Спинной рог содержит значительное количество опиоидных рецепторов и их эндогенных лиганд, в основном, производных про-энкефалина А и про-динорфина. Анальгетические (болеутоляющие) эффекты, вызываемые сегментальными и нисходящими модулирующими системами, а также назначением опиатов, по крайней мере, отчасти зависят от активации таких спинальных рецепторов. Аксоны (длинные нервные волокна) NS и WDR клеток имеют восходящее направление в спинном мозге, и, в основном, расположены на противоположной стороне. Несмотря на многочисленные межвидовые различия, данные, относящиеся к крысам, обезьянам и человеку, до некоторой степени представляются однородными. Основные проводящие пути – спинобугорный и спиноретикулярный. Другие проводящие пути, изученные у животных, включают спино-(понто-)-среднемозговой, спино-цервикальный (путь Морина), а также пост-синаптические волокна в задних столбах. Таким образом, ноцицептивные сигналы поступают в головной мозг через различные проводящие пути. Нео-спинобугорные тракты, которые заканчиваются в латеральном бугре, сохраняют достаточный объем соматотопии (локализации). Сигналы передаются от таламуса в соматосенсорные участки коры теменных долей, где, по-видимому, вырабатывается или, по крайней мере, инициируется сенсорно-дискриминирующее определение боли. Оба проводящих пути – палао-спино-бугорный и спино-ретикуло-бугорный – заканчиваются в медиальном таламусе; в этих системах соматотопия не сохраняется. В итоге, сообщение достигает крупных участков лобных отделов коры головного мозга, а также кортикальных и субкортикальных частей лимбической системы. Лимбическая система и лобные фронтальные кортикальные отделы участвуют в мотивационно- аффективном (эмоциональном) определении всех форм сенсорной информации, включая ноцицептивную информацию (Willis 1989, Willis & Coggeshall 1991). Ретикулярная формация Медиальная восходящая система проводящих путей, в основном, соединяет спинной рог с медуллярными центрами ретикулярной формации, регулируя кровообращение и дыхание. Следовательно, автономные (симпатические) рефлексы вызываются ноцицептивными раздражителями, такими так повышенная частота сердечных сокращений и повышенный уровень артериального давления, нарушение дыхания, расширение зрачка и угнетение сократительной способности желудочно-кишечного тракта. Кроме того, указанные соединения, по-видимому, активируют нисходящие модулирующие системы (см. выше). Участки ретикулярной формации являются компонентами так называемой «восходящей ретикулярной активирующей системы», которая сохраняет тоническую активность и возбуждается различными формами восходящих сенсорных сигналов (в том числе ноцицептивных). Эта структура необходима для поддержания коры головного мозга
в «состоянии готовности». Представляется, что ноцицептивная информация особенно
эффективна для возбуждения (приведения в состояние готовности) коры головного
мозга. Находящаяся в возбуждении и состоянии готовности кора головного мозга
составляет основу сознания, а, значит, и восприятия ощущений (в том числе и боли).
Кора головного мозга
Как было отмечено выше, кора головного мозга необходима для реализации всех форм
ощущений, включая боль (Zieglgansberger 1986). Однако результаты клинических
наблюдений у человека привели к дебатам о роли коры головного мозга в связи с болью.
Во-первых, во время нейрохирургических операций у пациентов, у которых ранее
отсутствовали боли при прерывании афферентной иннервации (деафферентации),
лишь очень редко возникала боль при кортикальной стимуляции, хотя у них было
очень легко вызывать другие соматоэстетические ощущения при использовании этой
же формы стимуляции. Во-вторых, большинство попыток (предпринятых много лет
назад) облегчить хроническую боль путем удаления коры оказались неэффективными.
Интересно, что при использовании ЯМР и позитронно-эмиссионной томографии недавно
было продемонстрировано, что болевые раздражители активируют контралатеральные
сенсорные, а также передние поясные отделы коры (Jones et al. 1991, Talbot et al. 1991,
Kenshalo & Willis 1991).
Использовалось несколько различных методов для оказания помощи людям с
состояниями, сопровождающимися хронической болью, когда традиционные методы
лечения оказались неэффективными. Эти методы включали префронтальную лоботомию
и в более редких случаях сингулотомию. Следует отметить, что после использования
этих вмешательств для купирования хронической боли пациенты по-прежнему ощущали
боль, но она их не беспокоила, т.е. они уже не страдали от боли. Это свидетельствует
о том, что такие хирургические вмешательства могут разграничивать два показателя
боли и что мотивационно-аффективный компонент зависит от интактных соединений
между фронтальной корой и расположенными под ней участками переднего мозга.
Однако нельзя сказать определенно, можно ли и каким образом трансформировать
эти показатели физиологии человека на состояния животных. Фронтальные доли коры
головного мозга – это те участки, которые наиболее заметно увеличиваются в объеме
и развиваются в ходе эволюции позвоночных. Если способность к мотивационно-
аффективной интерпретации ноцицептивной информации возрастает с увеличением
размеров этих участков коры, то эта способность достигла бы высокого развития у
людей (и приматов). Однако можно считать, что все млекопитающие воспринимают и
испытывают боль и, более того, запоминают ситуации, связанные с этим ощущением.
Это должно быть положено в основу надлежащих действий, даже в том случае,
если считать, что у таких млекопитающих, как грызуны и лагоморфы, способность к
предварительной интерпретации связанных с болью ситуаций ниже, чем у людей.
III. Измерение анальгезии и анальгезии,
индуцированные условиями среды
В экспериментах на грызунах использовались многочисленные тесты для испытания
эффективности предполагаемых обезболивающих соединений. В их число входят
следующие методы: погружение хвоста в горячую воду (Janssen 1963); тест корчей,
вызванных уксусной кислотой (Koster et al. 1959); воздействие непредотвратимого
электрошока с нарастающими и понижающимися уровнями тока; методы давления
(использование щипцов или артериальных зажимов), интра-плантарное введение
дрожжей или каррагенина (Taber 1974), тест с отдергиванием хвоста при воздействии
источника тепла (D’Amour & Smith 1941) и тест горячей пластины (Woolfe & MacDon-
ald 1944). Некоторые из этих методов трудно контролировать, тяжело выполнять, и
они имеют весьма ограниченное применение, когда проводится оценка влияния тонкихизменений в содержании животных или исследовательских процедурах, в которых задействованы животные. Два последних метода, скорее всего, применимы при изучении благополучия животных, поскольку они наиболее чувствительны к опиатам, легко выполняются, требуют лишь простой аппаратуры и имеют четко определенные конечные результаты. В тесте с отдергиванием хвоста чувствительность к боли определяется посредством фокусировки источника излучения тепла от мощной лампы накаливания на кончике хвоста грызуна до момента рефлекторного отдергивания хвоста от источника тепла или появления мелких пузырьков белого цвета. Для проведения данного теста имеются полуавтоматические приборы. При использовании теста горячей пластины проводятся тесты у отдельных животных для определения ответной реакции на ноцицептивные раздражители; при этом температура пластины поддерживается на уровне 55оС. Эта температура, хотя и создает ощущение дискомфорта, не вызывает серьезных повреждений. К конечным точкам относятся лизание передних конечностей (животное сидит на задних лапах и зализывает передние лапы, как при умывании), лизание задних лап (голова обращена в сторону задней лапы, и вентральная поверхность под углом направлена вверх), а также подпрыгивание с целью избежать воздействия (животное подпрыгивает вверх, чтобы обе передние лапы были удалены от поверхности горячей пластины). При использовании таких тестов представляется возможным продемонстрировать, что на восприимчивость боли может влиять широкий круг факторов окружающей среды (некоторые из которых связаны с содержанием животных или лабораторными процедурами). Данный факт крайне важен при оценке влияния, которое процедуры оказывают на боль и дистресс. Было продемонстрировано, что самые разнообразные факторы вызывают четко проявляющуюся анальгезию у различных видов грызунов (см. Rodgers & Randall 1987). К ним относятся акупунктура, тревога, стимуляция головного мозга, щипки тела, центробежное вращение, классическое кондиционирование, совокупление (для самцов), электрошок стоп, физическая нагрузка, электросудорожный шок, лишение пищи, принудительное плавание, воздействие тепла, стимуляция гипертоническим солевым раствором, инсулин, облучение, новшества, опиаты, беременность/роды, присутствие хищника, удержание, социальный конфликт, социальная изоляция, стрессовые запахи, защемление хвоста, удар по хвосту, специфические запахи для мечения территории, чрескожное раздражение нервов и вагинальная стимуляция. В некоторых формах анальгезии участвуют эндогенные опиоиды, а другие формы не зависят от опиоидов. Некоторые формы регулируются нейронными факторами, другие – гормонами. Таким образом, существует множество форм анальгезии. Несмотря на вышеуказанные сложности технического характера, их анализ имеет существенное значение для того, чтобы иметь возможность определять и контролировать уровни боли, связанные с содержанием животных или экспериментальными процедурами. Прежде всего, следует отметить, что наличие большого опыта оказывает огромное влияние на результаты тестов по измерению анальгезии и что существует возможность того, что они меняют восприятие боли животными. IV. Чувствительность тканей и органов к боли Чувствительность отдельных тканей и органов зависит от иннервации тканей (виды рецепторов, чувствительность по отношению к раздражителям, плотность, размеры рецепторного поля), параметров стимула и возможной сенсибилизации на уровне рецептора, развивающейся в результате патологических тканевых реакций (таких как воспаление и ишемия). Чувствительность может изменяться в связи с процессами, влияющими на проводимость нервных волокон (напр., созревание нервной системы у молодых животных или повреждение нервов и их миелиновой оболочки при расстройствах метаболизма).
Информацию о чувствительности тканей можно получить в клинических наблюдениях, а также из опыта хирургических вмешательств у человека и животных. Более точные сведения могут быть получены при проведении гистологических и электрофизиологических исследований ноцицепторов, однако между экспериментальным подходом и клиническими данными все равно сохраняется «пробел». Кожные покровы Кожные ноцицепторы включают рецепторы, активируемые механическими (напр., давление), термическими и некоторыми химическими воздействиями (Besson et al. 1986, Raja et al. 1988). Эти механические и тепловые ноцицепторы составляют две различных группы, которые связаны, соответственно, с Аδ-волокнами и С-волокнами (стр. 5). Механико-тепловые ноцицепторы С-волокон стимулируются некоторыми химическими веществами и могут демонстрировать феномен сенсибилизации (порог снижается, когда они подвергаются воздействию медиаторов воспаления или других веществ). Ноцицепторы другого вида, «высокопороговые механорецепторы», активируется только интенсивными механическими стимулами. Ощущения боли, возникающие в коже (поверхностная боль), могут иметь высокую интенсивность и быть разнообразными, но при этом определяется точная локализация раздражения. Мышцы Мышцы демонстрируют высокую чувствительность только в редких случаях. Большинство рецепторов – это механорецепторы, и 75% из них находятся в кровеносных сосудах, сухожилиях и соединительной ткани (Raja et al. 1988). Более половины мышечных рецепторов стимулируются при внутрисосудистом введении веществ, вызывающих боль. Чувствительность мышечных рецепторов возрастает при наличии местных воспалительных процессов и, особенно, ишемии, индуцированной устойчивыми тоническими сокращениями (спазмами). Суставы и кости Как правило, суставы и кости относительно не чувствительны. Их рецепторы активируются только при наличии воспалительных или дегенеративных процессов. Кости чувствительны к повреждениям, в особенности, их поверхностного покрытия (надкостницы), которое вызывает острые боли после переломов или хирургического разреза. Однако, если рецепторы надкостницы разрушены патологическим процессом, чувствительность к боли может становиться незначительной (Crane 1987). Зубы и роговая оболочка глаза Зубы и роговая оболочка глаза относятся к наиболее чувствительным тканям. Плотность нервных окончаний в зубной пульпе в 20-40 раз выше, чем в коже. В роговице плотность рецепторов еще выше, чем в коже (в 300-600 раз) (Raja et al. 1988). Основная часть нервных окончаний в роговице (70%) обладают чувствительностью к механическим раздражителям, другие (17%) активируются только холодом, а оставшаяся часть активируется и теми, и другими. Внутренние органы Внутренние органы чувствительны к боли в меньшей степени, чем кожа, что объясняет четкое различие между «поверхностной» и «висцеральной» болью. Паренхиматозные органы (напр., печень и почки) не вызывают боли, за исключением случаев патологических повреждений или воспаления. Полые внутренние органы (напр.,
пищеварительный и мочевыводящий тракты) вызывают болевые ощущения только, если имеется механическое раздражение, возникающее при растяжении или спазмах, развивающихся одновременно с ишемией. Существование специфических висцеральных ноцицепторов доказано не полностью: боль во внутренних органах также может возникать в результате пароксизмальной стимуляции рецепторов и нервов, участвующих в реализации других функций, к примеру, регуляции перистальтики или сокращении сосудов. При боли, исходящей от внутренних органов, плохо дискриминируется вид раздражителей и не определяется точная локализация. Гетеротопическая боль часто встречается при повреждении висцеральных органов. Истинные ноцицепторы были открыты в двух внутренних органах: в области яичек и желчного пузыря (Besson et al. 1986), которые, как известно, вызывают очень острую боль у мужчин. В полостях организма (напр., брюшной и грудной полости) серозные оболочки (перитонеальная и плевральная оболочки) считаются участками, обладающими высокой чувствительностью к боли. Эта особенность становится очевидной при травмах (ранениях или хирургических операциях) или воспалении. Нервная ткань Нервная ткань различается по своей чувствительности к боли. Стимуляция периферических рецепторов и нервов (в том числе Аδ- и С-афферентных волокон) через спинной мозг индуцирует острое ощущение боли. Стимуляция задних столбов спинного мозга приводит к развитию болевых ощущений, сравнимых с действием электрического разряда. В отличие от этого, стимуляция ткани головного мозга не вызывает какой- либо боли, и стереотаксические операции можно выполнять, когда пациенты находятся в сознании. Общие комментарии Классификация органов и тканей по принципу уменьшения чувствительности выглядит следующим образом: роговая оболочка глаза, зубная пульпа, яички, нервы, спинной мозг, кожа, серозные оболочки, надкостница и кровеносные сосуды, внутренние органы, суставы, кости и ткань головного мозга. Хотя такая классификация может показаться полезной, она не реалистична, поскольку уровни чувствительности могут в существенной степени меняться в результате патологических процессов или экспериментальных процедур. В связи с этим необходимо учитывать все результаты практического опыта. Например, известно, что торакотомия (хирургическая операция в области грудной полости) более болезненна для четвероногих животных, если она выполняется с разрезом грудины, чем при выполнении разреза в мышцах между двумя ребрами (Haskins 1987, Johnson 1991, Sackman 1991). Провести оценку общей степени тяжести отдельных экспериментальных процедур важнее, чем классифицировать чувствительность тканей. V. Последствия боли и дистресса Аффективно-мотивационные (связанные с настроением) и когнитивно-оценочные (связанные с мышлением) показатели боли представляют особый интерес при оценке их эффектов на функциональное состояние организма. Аффективно-мотивационные процессы связаны с выделением нейротрансмиттеров и, в конечном счете, адренокортикальных и адреномедуллярных гормонов, а также эндогенных опиатов. Результатом может быть стресс или анальгезия. Когнитивно-оценочные процессы могут модулировать эти нейроэндокринные ответные реакции, изменяя пороги обнаружения боли. Имеется лишь ограниченное количество публикаций об эффектах боли на физиологические функции, однако в литературе накоплено много данных о корреляции эндокринных факторов и стрессов. Таким образом, боль обычно происходит в результате активации автономных (= стресс) ответов (Manser 1992).
Если в экспериментах нельзя избежать использования потенциально болезненных или стрессовых процедур, необходимо знать о том, каковы последствия стресса для функции сердечно-сосудистой, дыхательной, желудочно-кишечной и других систем. Накоплен значительный объем данных, свидетельствующих о том, что стресс различного характера (острый и хронический) и продолжительности может оказывать различное влияние (Adams et al. 1987, Cabib et al. 1988, Melia & Duman 1991). Более того, воздействие этих параметров на реакцию, развивающуюся в ответ на стресс, может изменяться, в зависимости от генетического фона (Marek et al. 1991.) или физиологического состояния, напр., беременности (Pascoe et al. 1991). Такие факторы также влияют на чувствительность к боли (Zamir wt al. 1980, Gintzler & Bohan 1990) и, скорее всего, изменяют эффекты, которые боль оказывает на функции организма. Поэтому не удивительно, что процедуры, с точки зрения развития боли и дистресса, приводят к противоречивым исходам. Например, у пациентов, испытывавших боль, отмечена более высокая частота распространенных инфекций (Benedetti 1990), что, возможно, обусловлено давно известными иммунодепрессивными эффектами кортикостероидов (Berczi). Эти данные отличаются от наблюдений, свидетельствующих о том, что боль (Fu- jiwara & Orita 1987) и стресс (Jessop et al. 1987) могут приводить к усилению иммунитета. Все эти процессы характеризуются временной зависимостью. В качестве примера можно привести противоположные эффекты острого и хронического стресса (Cabib et al. 1988), а также исследования, показывающие, что реакция на стресс имеет динамический характер (Reznick 1989). Кроме того, функциональное реагирование на боль и дистресс может быть модифицировано (Siegfried wt al. 1984). Если боль или стресс повторно совпадают с наличием какого-либо фактора окружающей среды, функциональная реакция (анальгезия или релизинг кортикостерона) может, в конечном итоге, вызываться наличием только этого фактора окружающей (или экспериментальной) среды. Кроме того, предполагаемые анти-ноцицептивные нейротрансмиттеры оказывают воздействие на другие системы, напр., эндорфины влияют на иммунные факторы (Johnson & Torres 1988), а субстанция Р вызывает нарушения функции сердечно-сосудистой системы (Ur- banski et al. 1989). Также необходимо учитывать последствия нарушения мышечной активности на участке, пораженном болью. Другие функции могут нарушаться вторично, в зависимости от того, на каком участке имеется поражение мышц (напр., двигательная активность или дыхание). Наконец, в недавно проведенных исследованиях послеоперационной боли у людей было показано, что уровни заболеваемости и смертности значительно снижаются, если в послеоперационном периоде обеспечено адекватное обезболивание (Benedetti 1990). Суммируя вышесказанное, трудно прогнозировать точные эффекты боли и дистресса у отдельных особей или в конкретных экспериментах. Следует рассматривать эти случаи на индивидуальной основе. Как правило, наличие боли и дистресса приводит к увеличению вариабельности экспериментальных результатов. Это обусловлено различными реакциями нейротрансмиттеров и гормонов, выделение которых они вызывают. Следовательно, тема боли и дистресса у животных изучена недостаточно, за исключением исследований самой боли. Этот практический аспект подчеркивает значимость этических причин для минимизации таких условий в экспериментах. VI. Юридические обязательства Рассмотрение национальных законодательств европейских стран по защите животных, используемых для экспериментальных целей, показывает, что в тексте всех этих документов встречается, по крайней мере, один из таких терминов, как «боль», «дистресс» или «страдание» (Таблица 1).
Таблица 1.
Ссылки на термины, используемые в национальных законодательствах по использованию
экспериментальных животных в европейских странах
Градация Анализ эф-
Боль Страдание Дистресс по степени фективности
тяжести затрат
Австрия Да Да Да Нет Да
Бельгия Да Нет Нет Нет Нет
Дания Да Да Да Нет Нет
Финляндия Да Да Да Нет Нет
Франция Да Да Нет Да Нет
Германия Да Да Да Нет Да
Ирландия** Да Нет Нет Нет Нет
Италия Да Да Нет Нет Да
Люксембург*** Да Да Нет Нет Нет
Нидерланды Да Да Да Да Да
Норвегия*** Да Да Да Нет Нет
Испания Да Да Да Нет Да
Швеция Нет Да Да Да Да
Швейцария Да Да Да Нет Да
Соединенное Да Да Да Да Да
Королевство
* В Греции и Португалии законодательство находится на этапе подготовки
** Используется законодательство Соединенного Королевства от 1876 года
*** Используется общий закон о защите животных
**** Закон от 1974 года находится на этапе пересмотра
Однако все европейские страны являются участниками Директивы Европейских
Сообществ 86/609/EEC или «Европейской Конвенции о защите позвоночных животных,
используемых для экспериментальных или других целей» Совета Европы (1986 года).
Как в Директиве, так и Конвенции, используются все три термина. Как правило, в
проектах содержится требование об исключении или минимизации таких состояний
(соответственно цели научного исследования). Следует рассматривать альтернативные
варианты для тех процедур, которые вызывают боль, страдания и дистресс. Такие
альтернативные методы следует выбирать во всех случаях, когда это позволяют цели
исследования. Кроме того, эксперименты должны выполняться на тех видах животных,
у которых неврологические реакции развиваются в минимальной степени и которые
подходят для целей процедуры.
Лишь в нескольких из проанализированных документов содержалось требование
о проведении оценки и градации степени тяжести экспериментальных процедур.
В случаях, когда такая оценка необходима, она должна отражать потенциальные
нежелательные последствия, которые могут развиться у животных. Примеры степени
тяжести различных процедур приведены в Указаниях (Home Office 1990) к Закону
Соединенного Королевства о животных (научные процедуры) от 1986 года. Забор
образцов крови малого объема, кожные пробы с веществами, для которых ожидается
лишь легкое раздражающее действие, обычные малые хирургические процедуры под
анестезией (такие, как лапароскопия), поверхностная биопсия небольших кусочковтканей или установление канюли в крупные кровеносные сосуды считаются легких процедурами, если они не выполняются повторно или сочетано у одного и того же животного. Процедуры средней степени тяжести включают: скрининг и разработку лекарств-кандидатов; исследования токсичности, исключающие летальные конечные результаты; большинство хирургических вмешательств, сопровождающихся анальгезией и лечением в послеоперационном периоде. Предполагается, что в число процедур тяжелой степени входят исследования острой токсичности с высоким уровнем заболеваемости или гибели (как конечный результат), некоторые исследования эффективности противомикробных препаратов и вакцин, некоторые модели заболеваний и крупные хирургические операции, приводящие к тяжелым страданиям в послеоперационном периоде. Еще одно требование, включенное в большинство европейских и национальных законов, касается использования адекватных обезболивающих, седативных средств или анестезии в процедурах, которые вызывают или могут вызывать страдания животных. Кроме того, некоторые законы требуют проведения анализа эффективности затрат, в рамках которого вызывающие боль и дистресс процедуры должны быть «сбалансированы» с ожидаемыми позитивными результатами исследования. VII. Источники боли и дистресса Боль и страдания могут развиваться у животных вследствие различных видов деятельности, которые осуществляются в вивариях. Некоторые из этих видов деятельности легко определить, а другие не столь очевидны. Транспортировка Если использовать такие метрики, как смертность, состояние, поведение и эндокринные изменения, становится понятным, что транспортировка от поставщиков до места содержания животных может стать серьезным источником стрессов. Разумеется, такие факторы, как конструкция клеток и автомобиля, обеспечение кормом и водой, продолжительность транспортировки, уход и обращение с животными, воздействие испарений, различных уровней температуры или шума, определяют уровень проблем, связанных с перевозками. Перемещение внутри учреждения также может вызывать у животных стресс. Физические факторы, связанные с макросредой Значительные колебания окружающей температуры, освещения (особенно у животных, ведущих ночной образ жизни), относительной влажности и шума могут стать значимыми источниками дистресса для лабораторных животных. Также понятно, что определенные процедуры могут вызывать боль. Некоторые, на первый взгляд, безопасные ситуации, например, когда мыши находятся поблизости от крыс (являющихся природными хищниками) или когда используются неэкранированные (посредством электронных средств) средства визуализации, работающие пылесосы или вода, текущая из крана (это – источники ультразвука), могут вызывать дистресс и связанное с ним аномальное поведение у лабораторных грызунов. Распространенная практика, связанная с включением радио в комнатах содержания животных, также выглядит весьма спорной. Физические факторы, связанные с микросредой Конструкция и строение клеток могут оказывать значительное воздействие на благополучие животных. Такие факторы, как возможности для физической активности или исключение прямого контакта c «соседями» по клетке, могут иметь важнейшее значение. Хотя очистку клеток необходимо проводить для того, чтобы исключить
воздействие высоких уровней аммиака, сама операция уборки у некоторых животных может вызывать выраженное беспокойство, особенно у тех, которые оставляют запаховые метки. Пересадка грызунов из сложившихся групп в новые условия сопровождается значительным стрессом, о чем свидетельствуют физиологические и поведенческие изменения. Уборка клетки часто сопровождается короткими схватками в группе грызунов-самцов, содержащихся в одной клетке. В определенные периоды времени цикла «свет/темнота» эта реакция минимизируется. Хотя это и может показаться странным, но животные часто испытывают больший дистресс, когда существующие субстраты разрушаются, но остаются на месте, чем при очистке клетки. «Соседи» по клетке (особенно самцы и лактирующие самки) становятся потенциальными источниками боли и дистресса для грызунов и лагоморфов (Brain 1990). В этом случае также необходимо понимать потребности определенных видов и обеспечивать надлежащий уход, когда животные размещаются в одной клетке. Хотя среди некоторых видов животных драки встречаются довольно часто, большинство животных обычно используют такие атакующие действия, которые не приводят к повреждениям особей того же вида. Также у них имеются анти-ноцицептивные механизмы, смягчающие вызванный стресс. Даже процедуры с «добрыми намерениями», такие как образование групп животных для целей спаривания, могут вызывать борьбу или преследование. В той же степени, в какой поведение животных (это касается как сексуальной, так и враждебной активности) включает первоначальную «неопределенность», до наступления «желательной» активности, процедуры могут вызывать и вызывают дистресс. Сомнительно утверждение о том, что содержание животных в клетках по одной особи не соответствует нормальным условиям. Ответная реакция на одиночное содержание в клетке зависит от вида животных и стадии развития: для большинства мышей-самцов может быть нежелательным наличие vis-ά-vis «изолированных собратьев»; при этом у них наблюдается более высокая активность коры надпочечников и более низкая активность гонад (Brain 1975). Многие сотрудники не признают, что грызуны и лагоморфы часто общаются с животными в соседних клетках, используя различные звуковые (в том числе ультразвуковые) и обонятельные сигналы. К примеру, было продемонстрировано, что крысы и мыши могут передавать сообщения о боли и дистрессе (вероятно, вызывая тревогу у находящихся по соседству животных того же вида), используя для этого различные ольфакторные сообщения. Разделение животных с тем, чтобы исключить их из пределов видимости друг друга (что, возможно, является незначительным сенсорным механизмом для грызунов), вряд ли обеспечивает «изоляцию» таких видов животных. Факторы, связанные с экспериментальными процедурами Методы, используемые при содержании животных и осуществлении лабораторной практики, могут стать источниками боли или дистресса. Трудно составить точный перечень таких разнообразных процедур, однако не вызывает сомнения, что они различаются по степени тяжести. Можно прийти к выводу о том, что эффективное общее и специализированное содержание животных, поведенческие исследования, лишение пищи и воды на срок до 24 часов относительно свободны от боли и дистресса. Нанесение меток в форме татуировок и использование других методов маркировки животных, введение различных веществ (см. таблицу А1 в LASA 1990), анестезия и восстановление после анестезии, а также хирургические вмешательства (см. таблицу А3 в LASA 1990), по-видимому, связаны с болью и дистрессом. Трудно оценить тяжесть таких процедур, как забор образцов тканей и биологических жидкостей организма веществ (см. таблицу А2 в LASA 1990), физиологические, фармакологические и токсикологические исследования, а также гуманное умерщвление животных. Необходима более точная информация о степени тяжести всех научных процедур.
VIII. Признаки боли и дистресса Требуются относительно простые средства для точной градации уровней боли и дистресса, чтобы их можно было применять при разнообразных обстоятельствах и выполняемых специалистами по уходу за животными, лаборантами и учеными процедурах, которые используются всеми европейскими странами в лабораториях, работающих с животными. Поскольку грызуны и лагоморфы не могут «устно» сообщать о своем «психологическом» состоянии или ощущениях, мы, в основном, полагаемся на изменения поведения, которые распознаются как активные, аверсивные (защитные) реакции, чтобы определить наличие боли у этих животных. Хотя сравнение с людьми может считаться лишь приближенным, наиболее эффективные системы медицинского скрининга боли у человека также в большей степени являются визуальными, а не вербальными. Протективные моторные действия включают общие рефлексы «ухода», а также менее специфические реакции типа «защищайся или убегай». Такие реакции обычно являются видоспецифическими. Также нельзя забывать о том, что вместо «ухода» прослеживается тенденция к реагированию на боль посредством блокирования моторной активности, приводящая к пассивному, обездвиженному состоянию. Это поведение чаще наблюдается у кроликов и птиц, но не характерно для грызунов. Висцеральные реакции, которые вызываются, в основном, повышенной активностью участков симпатической нервной системы, могут приводить к изменению частоты сердечных сокращений, артериального давления, характера дыхания, размеров зрачка, потоотделению или сократительной активности желудочно-кишечного тракта. Однако на основании этих висцеральных реакций нельзя делать заключение о наличии болевых ощущений, поскольку они могут вызываться ноцицептивными раздражителями у животных, находящихся в состоянии глубокой анестезии, подавляющем активность коры головного мозга. Изменения в общих или социальных поведенческих реакциях или в приобретенных реакциях избегания рассматриваются как выражение физической и эмоциональной боли. Нужно хорошо знать обычное поведение и его варианты у соответствующих видов животных, чтобы иметь возможность распознавать такие изменения и проводить их оценку. Научной ассоциацией по лабораторным животным (LASA 1990) доказано, что имеется важная «точка отсчета» при рассмотрении данной проблемы. LASA рекомендует, чтобы проводящие оценку благополучия животных сотрудники «были знакомы с нормальным поведением, внешним видом, физиологическими и анатомическими характеристиками каждого вида животных», так как это имеет первостепенное значение. Следует добавить, что отдельные линии (особенно мышей) характеризуются значительной вариабельностью в поведении и физиологии. Это может свидетельствовать о необходимости знаний на уровни штамма (Jones & Brain 1985). Важно понимать различия между видами животных, ведущих дневной и ночной образ жизни, а также признавать значимость определенных показателей (чтобы особи были теплыми на ощупь, имели хороший мышечный тонус, вычищенный шерстяной покров и стабильную массу тела). В документах LASA (1990) отмечено, что большинство лабораторных грызунов, когда они здоровы, будут предпринимать позитивные попытки избежать отлова и манипуляций. Экспериментальные животные должны беспрепятственно совершать движения, не отдавая предпочтения какой-либо конечности, не пошатываясь и не совершая движений по кругу. Dantzer (1991) and Ma- son (1991) недавно поставили под сомнение мнение о том, что стереотипы (повторные движения) являются показателями дистресса у лабораторных и сельскохозяйственных животных. В документах LASA (1990) говорится, что многие животные реагируют на острую боль, совершая простые рефлекторные действия, включая «уход от источника, который сопровождается вокализацией и затем облизыванием, дрожью или царапаньем
пораженного участка». Хотя это подразумевает, что животные последовательно реагируют на специфические стимулы, Rodgers (1989) проанализировал широкий спектр механизмов анальгезии, обнаруженных у грызунов, а также самые разнообразные факторы внешней среды, связанные с блокированием боли (см. Раздел III). Таким образом, один и тот же раздражитель может вызывать различные болевые ощущения у разных особей. В документах LASA (1990) говорится о том, что вторая стадия реагирования включает «некоторые изменения в поведении, неподвижность в сочетании с вокализацией, раздражительность, кратковременную анорексию и измененную позу». Также диагностическими признаками могут служить необычные звуки, напоминающие звуки лязганья, образования пузырьков или сопения. В этих случаях также можно учитывать образование ультразвука (Sales & Pye 1974). Получены фармакологические данные о том, что ультразвук, издаваемый новорожденными мышами, является информативным признаком “тревоги» (Nastiti et al. 1991). В документах LASA (1990) упоминается, что хронические боль и дистресс на ранних стадиях обычно протекают с менее выраженной симптоматикой, чем острая боль, и требуют тщательного наблюдения для определения изменений во внешнем виде и поведении, свидетельствующих об ухудшении состояния животных. Поведение и внешний вид могут стать информативными факторами для рутинной оценки боли и дистресса. Какие еще характеристики могут быть использованы для оценки боли и дистресса? Предполагается, что гормоны (особенно глюкокортикоиды) служат признаком стресса (обзор Brain 1990), однако многие гормональные факторы проходят сложный путь изменений, и само по себе взятие проб может стать стрессовым фактором. Broom (1991) предложил сочетанное использование поведенческих, физиологических (гормоны, частота сердечных сокращений) и иммунологических показателей (у животных в состоянии стресса часто нарушается выработка антител), а также травм, заболеваний, риска заболеваемости, показателей роста и репродуктивной функции для получения полной картины, отражающей степень благополучия животных. Кроме того, детальное патоморфологическое исследование может оказаться полезным при (ретроспективном) определении эффектов условий содержания и процедур на дистресс. Некоторые из этих показателей могут быть использованы для подтверждения степени тяжести боли и дистресса. Однако существует опасность выполнения избыточного объема вмешательств у животного, и для получения убедительных результатов достаточно того, чтобы разумно использовать поведенческие показатели, внешний вид и степень изменения массы тела в сочетании с патоморфологическими данными. Это – наиболее информативные показатели состояния здоровья и благополучия. Наконец, хорошие условия содержания животных могут оказаться самым лучшим показателем, который мы можем закономерно ожидать в повседневной практике. Имеется насущная потребность в систематической оценке информативности указанных индикаторов. Наряду с этим также необходимо повысить комплексность поведенческой оценки в лабораториях, работающих с животными. Устройства видеозаписи с блоком дистанционного управления могут быть очень полезными для этих целей. IX. Градация выраженности боли и дистресса у животных Представлены различные шкалы для определения боли и дистресса (в баллах) у лабораторных животных. Такие оценки могут быть важными на трех этапах экспериментальных процедур, а именно: при получении утверждения от этических комитетов; во время эксперимента per se; при проведении вскрытия. Реакция на боль зависит от возраста, пола, состояния здоровья, вида и штамма животных. Используемые при оценке боли критерии в различных схемах применяются дифференцированно. Все существующие методы считаются неудовлетворительными ввиду того, что они относительно субъективны. Однако большинство сотрудников считает, что они намного лучше, чем отсутствие любых методов.
В целом, дискомфорт можно оценивать с качественной и (более или менее) количественной точки зрения. Как для качественной, так и количественной оценки дискомфорта выполняются два этапа: сбор данных, который можно считать объективным процессом, и следующим за ним «переводом» в степень дискомфорта, что является субъективным процессом (Beynen et al. 1989a, b, c). Morton & Griffiths (1985), Beynen et al. (1988 a, b, c, d, 1989 a, b, c), LASA (1990), а также Barclay et al. при использовании Disturbance Index (1988) пытались определить сумму баллов для признаков боли и дистресса. Ассоциацией LASA определены компоненты выраженности и представлены цифровые данные, отражающие их потенциальный диапазон. Morton & Griffiths (1985) попытались установить корреляцию между клиническими признаками и степенью выраженности боли/дистресса, а для Distur- bance Index (индекса нарушений) использовались изменения в количестве движений, совершенных нормальной лабораторной крысой или мышью, которая была посажена в незнакомую клетку. Этот подход использовался для оценки степени тяжести процедур. Другие авторы (напр., Wright & Woodson 1990) используют качественные критерии, полученные при клиническом исследовании, или физиологические признаки, такие как расширение зрачка, степень открытия глазных век, преходящее повышение или падение артериального давления, частота сердечных сокращений, учащение и изменение дыхания (включая затрудненное дыхание и одышку), шевеление усиков, сокращение поднимающих волосы мышц, повышение температуры тела, повышенный мышечный тонус, потоотделение, изменения кожной температуры, выделения из прямой кишки, «неряшливый» внешний вид или избыточное лизание, снижение аппетита и необычная поза. Все эти схемы предполагают объективность, которая является скорее кажущейся, чем реальной, поскольку в большинстве случаев предполагается, что с болью и(или) дистрессом связаны различные признаки, но при этом не применяется статистическое взвешивание. Flecknell (1986), Sanford et al. (1986) и Zimmermann (1986) представили дополнительные материалы по поведенческим индикаторам боли у животных. Кроме того, можно использовать биохимические признаки, в том числе повышение уровней АКТГ, кортикостероидов и катехоламинов в плазме, а также снижение уровня половых стероидных гормонов в плазме. Однако их корреляцию с болью, в лучшем случае, можно назвать неточной. Предполагаемый «психологический» статус также можно оценить у животных, у которых, согласно классификации, отмечается угнетение, отсутствие реагирования, тревога, настороженность, возбуждение или агрессивность. Эти рейтинги следует сравнивать с предшествующим поведением и обычным поведением животных этого вида, породы или штамма. Состояние сознания может быть оценено в тестах, в которых используются визуальные или слуховые факторы угрозы и оцениваются рефлексы (со стороны века или сгибательные). Аномальная активность (от отсутствия подвижности до гиперактивности) может быть показателем боли или дистресса. В число других возможных показателей входят поза, выражение мордочки (когда это уместно), походка (напр., хромота), противодействие манипуляциям по уходу за животными (напр., в форме вокализации или нападения) или вокализация (звуки могут характеризовать определенные физиологические функции). Также могут быть информативными ответные реакции на анальгетики, вплоть до исчезновения признаков боли. Некоторые люди проводят дифференцирование между признаками острой боли, такими как защита, крик, членовредительство (лизание, укусы), беспокойство, потоотделение, лежачее положение, передвижение (отказ от движения) и аномальная поза (головой вниз и др.), и признаками хронической боли, такими как прихрамывание, лизание определенного участка, отказ от движений, потеря аппетита, изменения работы кишечника и мочевых путей, накопление секретов организма (уменьшение чистки шерсти) и изменения в поведении по отношению к обслуживающему персоналу. Buckwell (1992) представлен перечень физических признаков у грызунов, которые могут быть связаны с категориями «легкая, средняя и тяжелая степень», используемыми в законодательстве Соединенного Королевства. Этот подход в несколько модифицированной
форме представлен ниже.
Легкая Средняя Значительная
Меньшая прибавка Потеря Потеря веса
веса веса до 20% свыше 25%
Потребление корма и Потребление корма и Потребление корма и
воды за 72 часа составля- воды за 72 часа составля- воды за 7 дней составляет
ет 40-75% от нормального ет менее 40% от нормаль- менее 40% от нормаль-
уровня ного уровня ного уровня или анорексия
(полное отсутствие аппети-
та) в течение 72 часов
Частичная пилоэрекция Шерсть «дыбом» - Шерсть «дыбом» - выражен-
выраженная пилоэрекция ная пилоэрекция и другие
признаки дегидратации,
такие как деформация кожи
Ответная реакция Ответная реакция приглу- Отсутствие ответной
приглушенная, но имеется. шенная, у животного при- реакции на внешнюю
У животного присутствуют сутствуют приглушенные активность или
нормальные спровоциро- поведенческие реакции провокацию
ванные поведенческие даже, когда они спрово-
реакции цированные
Взаимодействие Незначительное взаимо-
с другими животными действие с другими
животными
Временами Периодически Постоянно
наблюдающаяся наблюдающаяся наблюдающаяся
«сгорбленная» поза, «сгорбленная» поза «сгорбленная» поза
особенно после введения (животное «застыло»)
дозы препарата
Временно Периодически наблюда- Состояние дистресса –
наблюдающаяся ющаяся вокализация присутствует не с
вокализация (когда провоцируется) провоцированная
вокализация
Временно наблюдающиеся Постоянно Выделения из глаз и носа
выделения из глаз и носа наблюдающиеся – постоянные и обильные
(обычно служат призна- выделения из глаз и носа
ками хроморфино-
дакриореи у грызунов)
Нормальное дыхание Периодически наблюда- Затрудненное дыхание
ется измененное дыхание
Преходящая дрожь Периодическая дрожь Постоянная дрожь
Отсутствие судорог Периодические судороги Постоянные судороги
Отсутствие распростертого Периодически находится Продолжительное время
положения в распростертом поло- находится в распростертом
жении (менее 1 часа) положении (свыше 1 часа)
Отсутствие Отсутствие Наличие
членовредительства членовредительства членовредительстваПредставляется возможным провести ретроспективную оценку степени дистресса, используя данные вскрытия (Walvoort 1991). Можно использовать следующие критерии: анаболический/катаболический баланс, напр., масса тела, мышечный объем, жидкостной баланс, жировые отложения, состояние шерстяного покрова и содержимое желудочно-кишечного тракта; нейроэндокринный баланс, напр., размеры гонад и адренокортикального слоя; иммунологической баланс, напр., интактность барьера, который образует слизистая желудка, размеры лимфоидных органов и наличие инфекция, а также поведенческий баланс, напр., «износ» ногтей на лапах и хроморинодакриорея. Morton (1990) также выделял области, в которые могут быть внесены усовершенствования, нацеленные на уменьшение боли, дистресса и тревоги у лабораторных животных. Он также предположил, что хороший уход и содержание животных имеют первостепенное значение. Считается, что выбранные тесты могут иметь значение не только для определения предпочтительной среды для лабораторных животных, но и для оценки отрицательных последствий процедур (Baumans et al. 1987, 1990). Выводы Боль, дистресс и страдание – концепции, которые трудно применять для лабораторных животных. Однако для сотрудников европейских организаций существуют как этические, так и юридические требования, касающиеся ограничения воздействия таких факторов. В связи с этим настало время рассмотреть, что может быть сделано в данной области. В настоящем отчете предпринята попытка осветить проблемы и предложить пути, которые могут способствовать их решению. Важно найти относительно простые средства точной градации уровней боли и дистресса, т.е. средства, которые могут применяться для широкого спектра обстоятельств и процедур, используемых специалистами по лабораторным животным, лаборантами и учеными в лабораториях, работающих с животными, которые находятся во всех европейских странах. Это необходимо для реализации естественного гуманного желания – минимизировать боль и дистресс у лабораторных животных, как гласит законодательство, а также выполнять анализ затрат (с точки зрения боли и дистресса)/ выгод (с точки зрения надежды на получение новых знаний) для научных исследований, которые поддерживают многие национальные органы власти. Несомненно, ученым требуется больше данных, поддающихся количественному определению, которые отражают влияние многочисленных процедур, применяемых в настоящее время при содержании животных и выполнении экспериментов (Brain 1992). Несмотря на наличие усовершенствованных лабораторных методов, представляется, что надлежащее содержание лабораторных животных и применяемые при этом технологии (в основном, основанные на правильной интерпретации поведения, общем состоянии и изменении массы тела) в сочетании с детальными патоморфологическими данными являются наилучшими средствами для оценки попыток улучшить условия, в которых находятся лабораторные животные. Это желательно не только с этической точки зрения, но и направлено на улучшение качества научных исследований. Важно признавать существующие межвидовые различия (и даже различия между штаммами одного и того же вида животных), а также избегать использования сотрудниками антропоцентризма во всех случаях, когда это возможно. Долг законодателей и ученых - информировать широкую общественность об опасностях, связанных с готовностью применять для других видов те значения, которые получены у людей. Действия, основанные на параметрах, полученных у людей, не всегда полезны для животных и даже могут оказаться пагубными.
Вы также можете почитать
